全自动凯氏定氮仪工作原理及使用说明

工作原理

样品中含氮有机物经浓硫酸加热消解，硫酸使有机物脱水，然后有机物炭化生成碳，碳将硫酸还原为SO2，本身则变成CO2，SO2使N还原为NH3，本身则氧化为S2O3，而消化过程中生成的H2，又加速了NH3的形成。在反应过程中，生成的H2O和S2O3溢出，而NH3则与H2SO4结合成(NH4)2SO4内溶液中，加入NaOH，并蒸馏，使NH3溢出，用H3BO3吸收后，用已知摩尔浓度的酸滴定，测出样品全氮含量，乘以氮与蛋白质的换算系数，即为粗蛋白质的含量。

使用说明

1.  仪器和用具

1.1  分析天平：感量0.0001g

1.2  实验室用粉碎机或研钵

1.3  酸式滴定管：25ml或10ml

1.4  锥形瓶：容积250ml

1.5  分样筛：孔径0.45mm(40目)

2.  试剂

2.1  盐酸（HCl）：分析纯（GB/T622-2006）0.05moI/L标准液，（4.2ml盐酸，注入1000ml蒸馏水）碳酸钠法标定盐酸。

2.2  氢氧化钠（NaOH）：化学纯（GB/T629-1997），40g溶于蒸馏水中溶成100ml，配成40%水溶液（m/V）。

2.3  硼酸（H3BO3）：分析纯（GB/T628-2011）2g，溶于蒸馏水中配成100ml 2%水溶液（m/V）。

2.4  混合指示剂：溶液Ⅰ：准确称取0.1g溴甲酚绿（C21H14Br4O5S）（HG/T4017-2008），溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100 ml。

溶液Ⅱ：准确称取0.2g甲基红（C15H15N3O2）（HG/T3449-2012），溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100ml。

取30 ml溶液Ⅰ、10mL溶液Ⅱ，混匀即可。阴凉处保存（保存期三个月以内）。

2.5  催化剂：硫酸铜（CuSO4·5H2O）分析纯（GB/T665-2007）10g；硫酸钾（K2SO4）（GB/T16496-1996）分析纯150g，在研钵中研磨，仔细混匀过40目筛。

2.6  浓硫酸(H2SO4)化学纯（GB/T625-2007）（含量98%、无氮）。

2.7  蒸馏水：为实验室用三级水、电导率（25℃，ms/m）≤0.50，电阻率（25℃，MΩ·cm）≥0.2

3.  样品制备

3.1  选取有代表性的样品，挑拣干净，按四分法缩减取样，粉碎至40目筛通过，装于密封容器中。（取样不少于200g）

3.2  液体试样，必须有代表性，取样后，先放在消化管内浓缩至体积（三分之一）再加入其他试剂进行消化。