Q1：核酸酶适用于哪些领域的哪些环节？

A1：核酸酶主要用于去除下游纯化中的HCD，降低粘度。应用领域主要集中在基因治疗、细胞治疗的病毒载体生产，使用环节是下游纯化，UFDF环节之前。

Q2：核酸酶的使用浓度是多少？

A2：一般的病毒载体纯化使用浓度是20-50 U/ml，溶瘤病毒的话使用浓度会高一些，可能会到100-150 U/ml。

Q3：蛋白不溶，需要在变性条件下纯化，pannarase核酸酶可以在尿素环境下消化核酸么？

A3：核酸酶在6M尿素条件下活性先增加，当尿素浓度到7M时，核酸酶会在15min后变性失活。因此在这个浓度下可适当提高核酸酶添加量补偿活性损失。

Q4：当反应温度低于37℃，如何保证pannnarase的消化效果？

A4：体系固定的条件下，核酸酶的消化效果取决于酶的用量、反应温度和反应时间。温度较低时，建议延长酶解时间，避免加入过多核酸酶造成残留过高。

Q5：怎样灭活pannarase核酸酶？如何去除？

A5：使用EDTA螯合金属离子可以可逆的抑制核酸酶的活性，条件会造成失活，如100mM NaOH，70℃处理30min等。核酸酶可采用阴离子交换柱从产物中分离出去。

Q6：产品应如何进行稀释？

A6：正确稀释比例是1：1000~1：20000，原储存液中含有50%甘油，酶液不会在-20℃冻结，但在不含甘油的缓冲稀释液中的酶需要尽快用掉，不推荐冻结后再次使用。

Q7:核酸酶的去除方法有哪些？

A7:切向流过滤、色谱法、滤器、阴离子层析等。

Q8:细菌或细胞裂解液里的核酸酶应该如何去除？

A8:随着工艺去除杂蛋白时会一并去除，不用特意纯化 。

Q9:Pannarase耐高盐核酸酶的来源与特点？

A9: Pannarase耐高盐核酸酶(EC 3.1.31.1)是一种来源于Staphylococcus aureus的热稳定非特异性核酸内切酶（Thermonuclease），具有耐盐和高温稳定性。

Q10：耐高盐核酸酶的盐离子耐受范围

A10：0-500 mM NaCl均能保持活性15%以上。