抗原修复锅的使用方法
时间:2018-09-25 阅读:2937
抗原修复锅Antigen Retriever
免疫组织化学方法成功与否关键在于抗原决定簇的保存和暴露.组织经甲醛固定.甲醛的醛基与
抗原蛋白的氨基交联,使决定簇的构像改变.从而影响检测蛋白表达.要充分暴露抗原决定簇,通
常用到抗原修复锅。强适于甲醛固定的组织,经石蜡包
埋后进行免疫染色前的处理,配合特别的抗原修复缓冲液确保你得到搞质量的免疫染色效
果。
· 一次可以在6中不同缓冲液中运行,进行抗原暴露
· 仅暴露抗原决定簇,不损伤组织的形态
· 实验结果稳定,结果重现性高
· 系列的玻片在独立环境中经过处理
抗原修复锅怎样工作?
看上去,抗原修复锅似我们烹饪的高压锅。这是一款功能*的“高压锅”,主要用于抗原暴露
的工作,主要的工作原理也是装玻片的几个分室可以达到高温(>120°C)高压。灵敏的传感控制
器来保持一定的温度和压力及一定的时间,这些工作参数都是经过严格的科学实验得到的数
据。当达到需要的温度,抗原修复锅会在该温度下保持几分钟,之后锅内玻片被冷却2个多小
时,特殊设材质的内锅体控制了锅和玻片的冷却速度。
谁是受益人?
研究病理的实验室,那里需要高质量染色照片(用来发表)的
缺乏技术人员的实验室,学生和博士后均可以处理玻片进行组织染色,且不需要很多时间来摸索
小型病理实验室,每天处理的玻片数量有限
怎样选择一种缓冲液(Buffer)
如果你已经知道哪种缓冲液用在微波的某种组织抗原修复,那么用抗原修复锅时,这种缓冲
液也同时适用的机会很大。我们提供四种即用型缓冲液R-Buffer A/B/C/U,同时也提供同种更加
温和的组织处理缓冲液,我们称之G系列,R-Buffer AG/BG/CG/UG。
选择Buffer,主要考虑以下两点:
1. 抗原的自然特性以及所选择的抗体
抗原自身特性和抗原的位置都是首要考虑。我们建议你刚开始的时候选择抗原表达环境的
适Buffer。以下是经验供大家参考:
Most of the nuclear antigens (apoptosis-related, survival-related, proliferation-r
elated) R: Buffer A (or AG).
Cell adhesion molecules, cell membrane antigens (extracellular domain) R: Buffer A (or AG)
Cytoskeleton and cytoskeleton-associated molecules – R:Buffer A (or AG)
Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer B (or BG)
Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer C (or CG)
Most of antibodies raised against a linear peptide – R: Buffer U (or UG)
2. 固定液以及固定程度
建议的组织切片的抗原修复处理是一种针对普通的适化状态切片。如果用来切片的组织块没有
充分固定,或者过固定(留在福尔马林溶液中时间过长),或者用了其它的固定液,那么,处
理组织切片的流程方案需要重新修订,便利的办法是选择使用G系列缓冲液。对于过固定的
材料一般推荐用U buffer,或者在同一Buffer里面增加循环
抗原修复锅技术参数:
Heigh | 335 mm |
Capacity | 9 litres |
Max. Instrument length | 228 mm |
Width. | 340 mm |
Net Weight | 4.5 kilos |
Internal chamber Dimensions (d/h) | 210/230 mm |
Max. Load Weight | 3.0kg |
Max. Single Fault Temperature | 133.3°C |
使用抗原修复锅进行染色的效果示例
1.福尔马林固定,石蜡包埋,人乙状结肠组织切片,经抗原修复锅进行抗原暴露,R-
Buffer C (pH 6.0),组织玻片降温过夜,抗体MIB-1,抗原Ki-67,R-Detect HRP系统染色
2. .福尔马林固定,石蜡包埋,人乙状结肠组织切片,经抗原修复锅进行抗原暴露,R-
Buffer A (pH 8.1),组织玻片降温过夜,抗体#4B11,抗原CD8 (cell membrane),R-
Detect HRP系统染色.
仪器及配件的选购:
货号 | 产品名称 | 规格 |
62700-20 | Retriever 220 volt (内含3个chamber) | 1 |
62705-01 | Slide Chamber | 3/pk |
62705-02 | Chamber Rack | 1 |
62705-03 | Lifting Device | 1 |
62705-05 | Cord Set (Europe) | 1 |
缓冲液的选购:
货号 | 产品名称 | 规格 |
62706-10 | R-Buffer A (10x) | 250 ml |
62706-11 | R-Buffer B (10x) | 250 ml |
62706-12 | R-Buffer C (10x) | 250 ml |
62706-13 | R-Buffer U (10x) | 250 ml |
62707-10 | R-Buffer AG (2x) | 250 ml |
62707-11 | R-Buffer BG (2x) | 250 ml |
62707-12 | R-Buffer CG (2x) | 250 ml |
62707-13 | R-Buffer UG (2x) | 250 ml |