单克隆抗体是用于治疗各种疾病的一类重要的生物分子。生物仿制药是创新药物分 子的复制品，需要详细表征其关键质量属性 (CQA)，例如聚集体和电荷异构体。与 创新药物相比，这些属性必须处于一定范围内才可获得监管机构批准。本研究采用 基于 Agilent 1260 Infinity II 生物惰性液相色谱和 Agilent AdvancedBio 色谱柱的两种 分析工作流程，对不同制造商生产的两种利妥昔单抗生物仿制药与创新药物的聚集 体和电荷异构体图谱进行了比较。结果显示了创新药物与生物仿制药在聚集体和电 荷异构体图谱方面的相似性或差异性。生物仿制药 1 与创新药物在聚集体和电荷异 构体方面的相似性高于生物仿制药 2。方法表现出优异的日内和日间重现性。Agilent OpenLab CDS 软件的 Peak Explorer 功能使数据审查一目了然。本研究是一系列利妥 昔单抗生物相似性研究的一部分。

单克隆抗体 (mAb) 药物是制药市场上 增长快的生物治疗药物之一。大多数 mAb 用于治疗癌症[1]。mAb 创新药物在 发现、开发、生产和临床试验方面投资巨 大，这也导致患者接受创新药物治疗的费 用通常很高。因此，创新药物的廉价仿 制药（称为“生物仿制药”）的需求量很 大。第yi款生物仿制药于 2006 年获准进 入欧洲市场，进入美国市场则是在九年 后，此时美国已于 2010 年 3 月实施《平 价医疗法案》。由于创新药物分子到期，生物仿制药的开发越来越受关注。 为了使生物仿制药获得监管机构批准，制 造商需要证明其生物制剂与对照品之间在 安全性、纯度和效价方面不存在具有临床 意义的差异[2]。在这一过程中，关键在于 开展广泛的比较分析研究，以了解创

聚集体、截短体和其他修饰形式（脱酰 胺、异构化等）是在生产过程或储存过程 中产生的与产品相关的杂质。药物中存 在这些杂质时，会影响药物的稳定性、 活性和有效性。因此，它们通常被视为 CQA，并且在整个生产过程中受到密切监 控和检测[3]。

本应用简报使用两种分析工作流程展示了 两种利妥昔单抗生物仿制药与其创新药物 之间在聚集体和异构体方面的比较结果。 *，利妥昔单抗是一种生物治疗药 物，用于治疗类风湿性关节炎、狼疮、血 管炎和皮肌炎。两种生物仿制药来自两家 位于不同地理位置的制造商。两种工作 流程均基于配备 AdvancedBio 色谱柱和 OpenLab CDS 的 1260 Infinity II 生物惰性 液相色谱系统。在弱阳离子交换 (WCX) 色谱柱上分离电荷异构体，在体积排阻 (SEC) 色谱柱上分离聚集体。图 1 详细展 示了两种工作流程。日内结果和日间结果 具有良好的重现性，确保了工作流程的可 靠性，并清晰地展示了创新药物与生物仿 制药之间的相似性和差异性。 

实验部分：仪器 该系统包括以下模块： • Agilent 1260 Infinity II 液相色谱仪生物惰性泵 (G5654A) • Agilent 1260 Infinity II 生物惰性 Multisampler (G5668A)，配备样品 冷却装置 • Agilent 1260 Infinity II 高容量柱温箱 (G7116A)，配备生物惰性热交换器 • Agilent 1260 Infinity II 二极管阵列检 测器 WR (G7115A)，配备生物惰性 流通池 • Agilent 1260 Infinity II 生物惰性多检 测器套装 (MDS) (G7805A)，配备双 角度静态和动态光散射 (DLS) 检测器 (G7809A)