摘要：本应用简报介绍了使用 Agilent 1260 Infinity II 液相色谱与 Agilent Ultivo LC/TQ 的联用系统分析蜂蜜样品中皮克级的极低含量氯霉素 (CAP)。此方法采用 Agilent Ultivo LC/TQ 开发，尽管该系统体积小巧，但结果毫不逊色。此应用是食品行业中蜂蜜生产、加工和商业化样品常规检测的理想选择，也十分适合用于学术研究目的。使用基于液液萃取 (LLE) 的简单样品前处理方法，能够成功实现基质中 50 ppt 的定量限 (LOQ)。

前言： CAP 是一种能够抑制蛋白质合成的广谱抗生素，长期接触会导致罕见且严重的血液疾病（再生障碍性贫血）以及骨髓损伤。由于 CAP 对人体具有明显的毒性作用，因此食品中的含量不得高于 0.3 ppb 的低性能要求限值 (MRPL)[1,2]。实验部分本研究采用以下溶剂：乙腈（Honeywell， LC/MS，货号 34967）；甲醇（Honeywell， LC/MS，货号 34966）；水（Millipore， Milli-Q）；乙酸乙酯（分析纯，Rankem）；氯霉素（安捷伦科技公司，货号 5091- 0591）。CAP 的所有工作稀释液均采用 100% 甲醇配制。图 1. CAP 和氘代 CAP HO HO H O O –O + N N Cl Cl HO HO H D D D D D O O –O + N N Cl Cl 氯霉素 D5-氯霉素三重四极杆 LC/MS 系统是美国、欧盟、 FSSAI 和其他国家/地区用于确认蜂蜜中 CAP 的金标准。本应用采用新款三重四极杆 LC/MS 系统 Ultivo LC/TQ。使用 Ultivo LC/TQ 获得的灵敏度优于欧盟食品法规规定的 MRPL。此工作流程仅使用 LLE，而传统方法需要结合 LLE 和固相萃取 (SPE)。由于省去了 SPE 步骤，我们实现了一种简单、省时的高性价比解决方案（图 2）[3,4,5]。通过采用结构相似的 CAP-d5 作为内标以减少变异，这一基于 Ultivo LC/TQ 的解决方案展现出了优异的特异性、线性和稳定性，能够提供可靠的结果。

结果与讨论由于规定的 MRPL 为 300 ppt，大多数分析实验室普遍将 100 ppt 设置为常规 LOQ。所提出的方法的检测限 (LOD) 为 25 ppt。但是，考虑到蜂蜜产品的多样性，建议的 LOQ 为 50 ppt。图 3 的 MRM 色谱图展示了稀释剂空白、LOD 和 LOQ。此外，通过进样各种浓度的 CAP 稀释液，获得了可重现的洗脱曲线，如图 4 所示。表 2 显示了六次重复测定获得的 CAP 浓度计算值的变异系数 (CV%) 数据。