纤连蛋白Fibronectin-重组人纤维连接蛋白功能介绍
时间:2024-07-05 阅读:127
纤连蛋白Fibronectin-重组人纤维连接蛋白功能介绍
重组人纤维连接蛋白片段(Recombinant human fibronectin fragment,以下简称Fibronectin,纤连蛋白)为一段人工重组蛋白,由574个氨基酸组成,分子量约为63kDa。
纤连蛋白Fibronectin-重组人纤维连接蛋白包括三个功能区 :
[1] C-Domain:细胞粘附区域,含RGD序列,又称细胞结合域(central cell-binding domain)
[2] H-Domain:提供病毒粘附,又称肝***脂结合域(heparin-binding domain)
[3] CS-1位点:提供细胞粘附功能
纤连蛋白(Fibronectin)结构如下图所示
纤连蛋白Fibronectin-重组人纤维连接蛋白功能介绍
1. 提高逆转录病毒、慢病毒的转染效率
作用原理如下:
细胞表面VLA-4及VLA-5可分别与Fibronectin上的CS-1 位点及C-Domain结合,逆转录病毒载体可以与H -Domain结合。在经Fibronectin包被的培养容器表面,细胞与病毒载体以高浓度共存,从而显著提高病毒的转染效率30~70%。
2. 促进细胞黏连粘附及刺激细胞增殖
细胞的黏连是机体结构得以维持、细胞生长完成的必要条件,研究结果表明:Fibronectin作为细胞培养的基质,可以促进细胞的黏连生长,使多种细胞的贴壁率达到90%以上(对照组为10%),细胞形态结构良好,细胞的代谢率增强,DNA、RNA及蛋白质合成速度提高约5倍,细胞的集落率升高几倍,原代培养的成活率明显提高,细胞生长时间缩短。
同时,Fibronectin能刺激细胞上千倍的增殖。作用原理是: Fibronectin和抗CD3抗体可分别与T淋巴细胞上的VLA和TCR结合, 两者共同作用激活酪氨酸激酶pp125FAK,通过Ras途径刺激T细胞的增殖和分化,使其获得上千倍的增殖。
3. 其它应用
研究还证明,Fibronectin能提高细胞的融合率,缩短融合周期,可应用于许多科研中,如应用于细胞杂交瘤技术等。将Fibronectin涂到微球载体上作为细胞大量生产的介质,可以节省空间,节省原材料,成为应用培养细胞技术来生产新药品的基础物质。
赛尔瑞成提供高品质纤连蛋白Fibronectin-重组人纤维连接蛋白,是在符合GMP标准要求的洁净间由原核系统表达、经分离纯化和过滤除菌等步骤制成 ,分子量约为63.0 kDa。该产品具有高纯度,高活性,低内毒素的特点 ,并通过 ISO9001、ISO13485质量体系双重认证。
重组人Fibronectin产品特点
纯化自重组 E.coli 菌株,其中携带有编码人纤维连接蛋白片段的质粒
无血清无动物来源
内毒素水平:<1 EU/μg
纯度:经SDS-PAGE电泳检测纯度>95%
生物学活性: 在促进小鼠3T3细胞的粘附和增殖实验中,我公司生产的重组人Fibronectin表现出较好的促增值活性,结果如下图所示:
赛尔瑞成GMP级重组细胞因子
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赛尔瑞成有专业的原核发酵平台、蛋白纯化和制剂平台,2024年全新配备了500平米GMP级洁净间及相关仪器设备。技术团队常年从事抗体和重组蛋白的开发工作,曾承担国家“863"计划项目、国家重大新药创制项目、国家自然科学基金项目、省级科技攻关计划项目等,每年为客户提供200多种重组蛋白和重组抗体定制服务。
目前,赛尔瑞成已研发出几十种高品质重组细胞因子, 均是在符合GMP标准要求的洁净间内制备、质检、包装,产品均具有高纯度>95%,高活性,低内毒素<1EU/μg的特点。已广泛应用于细胞培养相关研究和工业化生产领域,并得到了大量客户的认可。同时,赛尔瑞成建立了完善的质量管理体系,通过 ISO9001、ISO13485质量体系双认证,有效保障了重组细胞因子产品的高质量和可追溯性。