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小鼠条件性恐惧模型的建立

小鼠购入后适应性饲养6d，实验当天提前1h放入实验间。不同品系小鼠放入电击箱内（A环境） 自由探索 2min（适应期）后，给与30s声音刺激 （85dB，5000Hz），后2 s伴随给与不可逃避的足底 电击（0.6mA，持续2s），声音-电击共配对5次，每 次间隔2min。计算机软件记录各个阶段（包括适应期、5轮声音刺激期和5轮间歇期）的僵住时间，僵住 时间百分率（%）=僵住时间（s）/总时间（s）×100%。 僵住行为是啮齿类动物表达恐惧的方式，表现为除 呼吸运动外全身其余的肌肉运动均消失。

02

场景恐惧和声音线索恐惧表达的检测

场景恐惧表达检测：条件性恐惧训练24h后， 将小鼠再次置于接受过电击的装置（环境A：足底电 栅栏+白光）中，不给与任何刺激，进行环境重现，使用VisuTrack软件（上海欣软）记录5min内的僵住时间（Freezing时间），计算僵住时间百分率，评价小鼠场景条件恐惧表达的特点。

声音线索恐惧表达检测：场景恐惧检测2h后， 将小鼠置于新环境（环境B：三角形半透明黑色套 盒+白色底板+无白光）中，2min适应期后进行30s声音刺激，声音刺激结束30s后将动物取出，记录各个阶段（包括适应期、声音刺激期和间歇期）的僵住时间，计算僵住时间百分率，用于评价3种品系小鼠线索条件恐惧表达的特点。

03

条件性恐惧的自然消退

以C57小鼠为研究对象，分别于条件性恐惧训练后第2，7，14，21和28天对其场景恐惧和声音线索恐惧进行检测，以评价该品系小鼠条件性恐惧的自然消退特点。其中，场景恐惧检测5min内僵住 时间（环境A，无声音信号，不电击），声音线索恐惧检测 30s声音刺激期内僵住时间（环境B，不电击， 2min适应+30s声音信号+30s间歇），计算僵住时间百分率。

04

声音线索恐惧消退训练和消退保持测试

以 C57小鼠为研究对象，在条件性恐惧训练（方法见第一段）后24h进行声音线索恐惧消退训练， 消退训练结束后24h进行消退保持测试。

消退训练方法：将C57小鼠放入B环境电击箱中，适应 2min后，采用“30s声音刺激+30s间歇期”方法给 与10次声音刺激，计算机软件记录适应期、10轮声 音刺激阶段和10轮间歇期的僵住时间，计算僵住时 间百分率，作为消退训练成绩。

消退保持测试方法：将 C57小鼠放入B 环境电击箱中，适应2min 后，给与30s声音刺激1次，刺激结束30s后将动 物取出，记录不同阶段（适应期+30s声音刺激期+ 30s间歇期）内僵住时间并计算僵住时间百分率， 作为消退保持成绩。

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文章引用（节选）

中国药理学与毒理学杂志2020年2月第34卷第2期，薛瑞，魏肇余，张森品，陈红霞，李云峰，张有志，《小鼠条件性恐惧模型的建立和品系敏感性研究》