生化试剂盒优势特点及操作说明
时间:2023-12-19 阅读:411
生化试剂盒优势特点及操作说明
通常生化试剂盒可分为液体单试剂和液体双试剂,前者特别适用于半自动生化分析仪和小型自动生化分析仪,使用方便,缺点是稳定性较差。与单试剂相比,双试剂提高了抗干扰能力,具有稳定性能较好,可消除样品自身空白等特点。此外还有多项同测组合试剂、浓缩试剂等。
操作流程:
1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃
2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不浓度的标准品50μL;
3、样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加
4、除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min
5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)
6、 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min
7、每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
注意事项:
1、加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
2、使用干净的塑料容器配置洗涤液。
3、按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
4、底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
5、洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
6、使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
7、实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
8、试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
9、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。