禽波氏杆菌PCR试剂盒试验原理：

禽波氏杆菌PCR试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。

禽波氏杆菌PCR试剂盒安全性：

1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

4. 禽波氏杆菌PCR试剂盒应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

5. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

6. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

7. 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

8. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

9. 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

10. 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

11. 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

12. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

禽波氏杆菌PCR试剂盒操作程序：

    1. 弃去液体，甩干，每孔加满稀释后洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。如此重复5次，拍干。

    2. 每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。。

    3. 取出酶标板，每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

    4.测定：以空白孔调零，在450nm波长下测量各孔的吸光度值（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

    5.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用禽波氏杆菌PCR试剂盒各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了的，其实际浓度应该乘以总稀释倍数。