荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点，可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。荧光分光光度计的发展经历了手控式荧光分光光度计，自动记录式荧光分光光度计，计算机控制式荧光分光光度计.光分光光度计三个阶段;荧光分光光度计还可分为单光束式荧光分光光度计和双光束式荧光分光光度计两大系列。

　　荧光强度容易受外界因素的影响，如样品池、激发光源、温度、溶液的pH值、溶剂性质、其它溶质、表面活性剂等都会造成荧光强度的变化。严格控制测试条件对荧光分析来说至关重要。

　　荧光分光光度计测试的注意事项有哪些：

　　①样品应盛在四面透光的石英比色皿（荧光池）中，如果是挥发性样品应使用带塞的荧光池。

　　②在荧光分析时，为了得到稳定可靠的数据，一般需要开机预热氙灯大约30min。如果仪器光源采用的是闪烁氙灯，预热时间可以缩短到10min左右。对某些易感光、易分解的荧光物质，尽量采用长波长、低人射光强度及短时间光照。

　　③温度变化可引起荧光强度的改变。通常降低温度，有利于提高荧光量子产率，荧光强度增大。温度影响荧光强度的显著程度因样品而异，大部分荧光物质的荧光强度受温度影响不大，测试温度变化不超过±3℃，对测试结果几乎无影响。

　　④当荧光物质是弱酸或弱碱时，溶液的pH对荧光强度有较大影响。因为弱酸或弱碱在不同酸度中，分子和离子的电离平衡会发生改变，而荧光物质的荧光强度会因其离解状态发生改变。以苯胺为例：在pH=7～12的溶液中会产生蓝色荧光，在pH<2或ph>13的溶液中都不产生荧光。再如，维生素B2（核黄素）在430～440nm蓝光照射下会发出绿色荧光，λem为535nm。它在pH=6～7的溶液中荧光强度大，而在pH=11时荧光消失；但在碱性溶液经光线照射发生分解作用或在酸性KMn04氧化下都会生成荧光强度比维生素B2强得多的黄光素，并可溶于。利用此性质可提高测定的灵敏度和选择性。

　　⑤分子结构中存在π-π共轭的荧光物质在极性溶剂中，荧光效率显著增强。溶液中表面活性剂的加入能够显著提高荧光强度。