ACQUITY UPLC M-Class，质谱灵敏度提升好帮手！
时间：2024-04-24 阅读：664
导语：2004年沃特世推出了UPLC技术，这一技术基于小粒径的分析方法，为使用者带来了更高的分析效率和更好的数据质量。二十载光阴流转，我们见证了这一技术从诞生到发展，再到如今革新的辉煌历程。作为液相色谱领域的创新者，沃特世始终致力于推动技术的进步，坚持以用户需求为导向，不断追求更高的分析精度和可靠性。值此UPLC二十周年之际，谨以此推文向UPLC系列产品致敬，敬请期待新品上市。
生物分离分析领域的分析科学家经常面临多种挑战，如对复杂样品中低丰度的蛋白质进行鉴定和定量。由于生物样品数量有限，基质干扰强烈，为了在有限条件下实现更高灵敏度的分析，分析科学家们通常通过提高质谱仪的灵敏度、使用更细内径的色谱柱、改造LC系统来改善LC/MS分析表现。常规LC系统改造策略，如进行管路改造或分流，虽然解决了LC系统的管路内径较大易导致样品扩散损失的问题，但往往会导致结果的重现性差，仪器性能不稳定，从而影响了分析的准确性和可靠性。为了解决以上难题，沃特世于2014年推出ACQUITY UPLC M-Class液相系统，致力于为分析科学家提供高灵敏、更可靠的实验结果。
图1. ACQUITY UPLC M-Class系统。
作为涵盖纳升级至微升级流速范围的UltraPerformance LC(UPLC)超高效液相色谱系统，ACQUITY UPLC M-Class不仅提供了优异的UPLC分离性能，还兼容不同规格的色谱柱，流速范围200 nL/min~100 μL/min，可灵活配置HDX技术、2D色谱和紫外检测器，适用于不同领域的各类应用。作为质谱仪的前端接口，该系统与高分辨质谱联用，能够对复杂样品进行深度分析表征和研究；而与四极杆质谱联用，则适用于多肽、代谢物的定量分析或其他靶向性分析工作，如生物标记物的验证等，其出色的灵敏度满足了日益增长的分析需求，为科学家们解决复杂的分析难题提供了有力支持。
图2. 采用ACQUITY UPLC M-Class系统的HDX-高分辨质谱仪平台。
图3. 左图显示了在线胃蛋白酶消化后钙调蛋白肽段的色谱分离图。右图显示了从10秒到240分钟标记的肽段（ADIDGDGQVNY）的质谱结果。随着在D2O中暴露时间延长，m/z值会随之增加。
采用ACQUITY UPLC M-Class系统的HDX平台可充分利用UPLC的分离能力，与高分辨质谱联用实现对蛋白质构象的细微变化进行定量分析。HDX数据有助于监测蛋白质构象，定位结合位点和构象变化区域，为候选药物与靶蛋白的结合、生物制药产品开发、蛋白质间相互作用等研究提供信息。
图4. ACQUITY UPLC M-Class系统与串联四极杆联用。
图5. ionKey/MS系统iKey HSS T3, 100Å, 1.8 µm, 150 µm×100 mm与ACQUITY UPLC 2.1 mm内径色谱柱结果对比。与ACQUITY UPLC 2.1 mm内径色谱柱相比，当注入相同体积时，使用ionKey/MS系统能够使mafei的检测灵敏度提高9倍。
微流级ACQUITY UPLC M-Class系统与使用ionKey技术的串联四极杆联用，有效提高了电喷雾质谱的电离效率，节约了流动相溶剂和样品的制备成本，相比于常规的分析级LC-MS平台能够显著提高生物制药相关分析物（如肽、抗体、寡核苷酸）定量的灵敏度。
ACQUITY UPLC M-Class
发挥优异性能，为数据保驾护航
稳定性：低系统体积和流路设计，结合直流自动溶剂流量控制算法大大减少了色谱分离过程中地扩散和由于吸附而造成的样品损失，从而保证了分析结果的准确性和可靠性。 灵敏分析：内部流路全惰性系统材质和专为微升级分离而优化设计的新型微升级ESI质谱喷针、低扩散流通池等，显著提高目标物的回收率，保持峰容量，保证了光学检测的高分离度和灵敏度。
出色分离度：沃特世还推出了专为低扩散纳流液相色谱系统而设计的Waters nanoEase M/Z纳流和微流LC-MS色谱柱，通过ZenFit连接技术改善由连接变化引起的色谱表现不一致情况。这些分析柱充分利用了固定相亚2 µm颗粒技术的分离能力，适用于复杂肽和蛋白质纳升级、毛细管级和微升级UPLC分离。
图6. 具有ZenFit连接技术，适用于纳升级到微升级LC-MS分析的沃特世色谱柱。
十年来，稳定可靠的纳升至微升级ACQUITY UPLC M-Class分离系统以其性能和应用领域，为生物分离分析领域的研究人员提供了强大的支持，在蛋白质组学、代谢分析、代谢物鉴定和药代动力学研究等领域均有广泛应用。