普析紫外可见分光光度计的校准与验证方法
时间：2024-09-13 阅读：1263
一、校准方法
1、波长校准：波长校准是确保仪器测量波长准确性的关键步骤。通常使用汞灯或氘灯作为光源，通过观察特定波长下的吸收峰来进行校准。具体步骤如下：
将仪器设定在特定波长。
放置校准灯，调整光路使其通过样品池。
观察吸收峰，记录实际波长值。
2、吸光度校准：吸光度校准通常使用标准溶液进行。具体步骤如下：
准备一系列已知浓度的标准溶液。
将每个标准溶液依次放入样品池中，测量其吸光度。
将测得的吸光度值与理论值进行比较，计算相对误差。
3、基线校准：基线校准用于消除背景干扰，确保测量结果的准确性。具体步骤如下：
使用空白溶剂作为参比，测量其吸光度。
调整仪器的基线调节装置，使空白溶剂的吸光度值为零。
重复测量几次，确保基线稳定。
二、验证方法
1、精度验证：精度验证用于评估仪器测量结果的准确性和一致性。具体步骤如下：
准备一系列不同浓度的标准溶液。
分别测量每个标准溶液的吸光度，计算其平均值和标准偏差。
计算相对标准偏差，评估仪器的精度。
2、重复性验证：重复性验证用于评估仪器在同一条件下多次测量结果的一致性。具体步骤如下：
使用同一标准溶液，连续测量多次。
计算每次测量的吸光度值，求其平均值和标准偏差。
计算相对标准偏差，评估仪器的重复性。
3、线性验证：线性验证用于评估仪器在一定浓度范围内测量结果的线性关系。具体步骤如下：
准备一系列不同浓度的标准溶液。
分别测量每个标准溶液的吸光度，绘制吸光度-浓度曲线。
计算曲线的线性相关系数，评估仪器的线性。
三、注意事项
校准频率：建议每年至少进行一次全面的校准和验证，对于使用频繁或环境较差的仪器，可适当增加校准频率。
标准物质：使用有证标准物质进行校准和验证，以确保测量结果的溯源性。
环境条件：在校准和验证过程中，确保环境温度、湿度、振动等条件符合仪器的要求，避免外界干扰。