乐研化学薄层层析硅胶板涂层的主要成分为SiO₂^.nH₂O，化学性质稳定，除强碱外，不与其他酸碱反应。具有分离效果好，塔板数高，点样斑点小，分离时间短，灵敏度高，斑点清晰，不扩散等特点；适用于医药，化工，生化，环保等系统的科研和检测；对于某些微量以及成分复杂的化合物有很好的分离效果，适用于定性和半定量分析。

经典操作和注意事项：

1、点样 

分析板：

点样一般为圆点（不能太大），点样基线距底边0.5~1.0 cm，点样直径为1~2 mm，点间距离约为0.5~1.0 cm，点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜；

注意事项：

（1）配制样品溶液时应选用对组分溶解度较好的溶剂；溶剂的粘度不宜过高，以便于点样；溶剂的沸点要适中，沸点过低，样品溶液中溶剂易挥发，会改变溶液浓度导致较大误差。沸点过高，会使样品溶液的溶剂残留于原点，导致展开剂极性异常变化，常用的溶剂为甲醇；

（2）点样时要控制力度，避免损伤涂层表面；

（3）点样后必须待溶剂挥发*后，再进行展开，但要避免长时间高温加热，以免改变待测组分的性质。

制备板：

取一块制备板，在距离底部2~3?cm处用铅笔画一条直线；取一次性滴管，在吸管口处嵌入适量脱脂棉后吸入待分离样品溶液，沿着制备板上的基线均匀移动，然后用吹风机吹干，反复操作，直至上样完成；将制备板置于展开缸中，硅胶面背对展缸玻璃面；展开结束后，取出、晾干，在紫外灯下面用铅笔标出所需的色带，用刮刀刮下，选择大极性溶剂，浸泡搅拌1~2小时，过滤、洗涤、旋干即可。

注意事项：

（1）待分离的样品必须在硅胶中稳定；且难溶性样品不适合此方法；

（2）上样量的计算方法：1 mm厚的硅胶板的负载量不要超过5 mg/cm3。以20*20?cm，厚度为1 mm厚硅胶板为例：若上样带宽是0.5?cm，板子两边空出0.5?cm边际，上样量约为0.5*19*5=47.5 mg，以此类推；

（3）基线必须保持在展开剂的液面以上，防止待分离样品溶于展开剂；

（4）为保证溶出效率，需将刮下的硅胶碾碎。安全起见，操作者应带口罩，在风速小的环境下进行；

（5）浸泡硅胶常用的溶剂是二氯甲烷/甲醇：20/1~10/1，注意不能超过这个比例，否则硅胶中的部分物质会被溶解；

（6）制备板展开前后，所有使用的容器都要确保干净，尽量避免使用真空油脂；

2、展开剂

（1）化合物分离效率大小用Rf（化合物距离基线的距离除以溶剂的前沿距基线的距离）值表达，Rf值在0.15~0.85之间，尽量控制主要物质Rf值在0.3~0.7之间，Rf值与展开剂的相对极性有密切关系。其中常用溶剂的极性顺序如下：水（大）>甲酰胺>乙腈>甲醇>乙醇>丙醇>丙酮>二氧六环>甲乙酮>正丁醇>乙酸乙酯>异丙醚>二氯甲烷>三氯甲烷>溴乙烷>苯>四氯化碳>二硫化碳>环己烷>己烷>煤油（小）；

（2）展开剂的选择：单一的溶剂往往不能达到很好的分离效果，正常使用混合溶剂即高极性与低极性组成的混合体系（不限于2种，有可能是3种以上，根据底物的性质决定），常用的溶剂组合有：石油醚/乙酸乙酯、二氯甲烷/甲醇、石油醚/丙酮、石油醚/二氯甲烷、乙酸乙酯/甲醇、乙酸乙酯、乙酸乙酯、乙腈/水等，具体比例要结合实际情况，或参考文献中报道的展开剂配比；

（3） 薄层层析硅胶板展开过程中部分样品会有拖尾现象，主要是因为样品具有酸或碱的化学成分，且部分在溶液中电离，展开时存在分子，离子两种状态，主要解决方法是：若样品酸性比较大，一般在展开剂中加酸（0.1%~0.5%甲酸，乙酸）；若样品碱性比较大，一般在展开剂中加碱（0.1%~0.5%氨水，三乙胺）。

3、展开室

薄层展开室需预先用展开剂饱和，可在室中加入足够量的展开剂，并在壁上贴二条与室一样高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，密封室顶的盖，使系统平衡。将点好样品的薄层层析硅胶板放入展开室的展开剂中，浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5~1.0cm(切勿将样点浸入展开剂中)，密封室盖，待展开至规定距离，取出薄层板，晾干，并进行后续的检验。

4、常用显色剂及其配制方法

5、储存与活化

薄层层析硅胶板具有很强的吸湿性，应存放于密封干燥处，请勿与易挥发性物质一起存放。拆封后未用完的硅胶板应立刻密封，以免吸潮或吸附其他化学物质而影响分离性能；若硅胶板吸潮，可活化后再使用（放置于110^oC的烘箱中，烘30分钟）

6、安全防护措施

薄层层析硅胶板的使用中需要全程带手套，若不小心被玻璃板划伤，可参考如下方式做紧急处理：

（1）若伤口不大不深，出血不多，伤口干净，可用酒精消毒伤口周围，不要将消毒液弄进伤口内，待干后用消毒纱布覆盖包扎，或用创可贴粘贴；

（2）若伤口不干净，要先用碘酒沿周围皮肤消毒一次，再用酒精消毒两次，然后用少量生理盐水冲洗伤口，冲洗时用药棉轻轻擦拭伤口，去除异物，后再对伤口周围的皮肤进行再一次消毒，并用纱布覆盖包扎；

（3）若伤口较深，接触到化合物，还须速去医院，进行专业的医护处理，必要时注射破伤风育苗。