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外泌体粒径检测服务是包含核酸和蛋白质的小囊泡(30-200 nm),是由各种各样的细胞分泌产生,在血液、唾液、尿液及乳汁等体液中大量存在。本产品是自主开发的外泌体快速提取试剂盒,经过优化处理适用于细胞培养上清液、血清、血浆、尿液和其他体液(脑脊液、腹水、羊水、乳液以及唾液等)中的外泌体提取,并搭配纯化过滤装置,可快速高效获得高纯度的外泌体颗粒。
测量外泌体的粒径分布一直以来都是外泌体表征的重要组成部分。但是由于外泌体的尺寸仅为30~200 nm,所以必须借助一些特殊的检测手段才能够对这种在光学显微镜下不可视的颗粒进行观测。本篇就外泌体粒径测量技术的发展进行简述,并对不同技术的差异进行比较。在外泌体发现的早期,由于还没有专门针对这类尺寸颗粒的分析方法,因此直接在电镜下面观察粒径并统计成为了最早的外泌体粒径统计方法。但是这种方法费时费力,且通量低,在面对临床和科研中的大量样本时显得十分无力。
由于外泌体与材料学所合成的脂质体在形态上十分相似,因此用于脂质体表征的动态光散射技术(DLS)便被应用于外泌体的尺寸测量上。DLS利用光射到远小于其波长的小颗粒上时会产生瑞利散射现象,通过观察散射光的强度随时间的变化推算出溶液中颗粒的大小。但是这种技术会受到测量物质的颜色、电性、磁性等理化特性的影响,并且对于灰尘和杂质十分敏感。因此使得DLS在测量尺寸较小的粒子时,测量出的粒径与实际的分布具有较大的偏差。
为了弥补DLS的短板,纳米粒子跟踪分析(外泌体粒径检测服务)技术孕育而生。这种技术采用激光散射显微成像技术,用于记录纳米粒子在溶液中的布朗运动轨迹,并通过Stokes-Einstein方程推算粒子大小。这种技术能够对30~1000 nm的粒径进行测量,因此能够提供更为精确的粒径数据。在诸多文献的测试中均取得了较DLS更好的精度,因此成为目前最为主流的外泌体尺寸测量手段。
外泌体粒径检测服务技术的工作原理与DLS技术在测量不同尺寸纳米球的数据对比。可见相比于DLS,外泌体粒径检测服务测量的粒径分布更为精确。
虽然外泌体粒径检测服务取得了比DLS 更高的精准性,但是随着外泌体研究的深入,其局限性也十分明显。首先外泌体粒径检测服务仅能够测量溶液中颗粒的平均粒径尺寸,但是外泌体粒径检测服务无法分辨其中的外泌体、囊泡、脂蛋白,也不能区别不同源性的外泌体。这直接限制了外泌体粒径表征的意义,使得研究者很难探究外泌体尺寸与外泌体来源之间的关系。另外外泌体粒径检测服务本身对于测试时的温度、浓度和校准都有着较高要求,因此使得外泌体粒径检测服务在测试较小的粒子时其精度仍不能达到令人满意的效果,其测试结果却仍与电镜、AFM等成像技术所观测到的粒径存在着明显差异。外泌体在TEM下的成像及粒径统计与外泌体粒径检测服务测量的结果对比。可见外泌体粒径检测服务测量到的粒径要比TEM直接测量的结果大50~100。
表征测试是外泌体研究的重要一环,特别是针对分离提取后的外泌体进行浓度检测和粒径分布检测,对于后续的功能和进一步分析是*的步骤。表观生物提供基于Nanosight仪器定量检测外泌体粒径和浓度,方便、快捷、精准,助您深入探索外泌体的神秘世界!
仪器利用激光光源照射纳米颗粒悬浮液,利用全黑背景则功能强信号,可以清晰观察到带有散射光的颗粒的布朗运动。对于宽分布体系,NTA软件可以同时对于每一个颗粒进行直接观测,进行自动跟踪,进行粒径计算,并且同时得到整个体系的粒径分布信息。结合颗粒的散射强度,可以绘制出粒径,对应数量分布强度和散射强度的三维图谱,可以对于粒径相同但是材质不同的样品作出清晰区分。可以保存颗粒运动的录像和图片信息,用于将来做进一步分析。
2、送样时,样品须一直处于低温环境中(推荐干冰寄送;短时间内可以采用蓝冰条件下运输);
3、送样前须告知溶剂的具体情况;可使用的溶剂,默认为水,其他非腐蚀性溶剂也行;但折射率需与水接近(1.3-1.5),如油不可作为溶剂
毓秀生物科技(上海)有限公司是一家专注于生物科技前沿技术研发和科研技术服务的公司,公司建有专业的分子生物学、细胞生物学、组织病理学实验室,为众多生物医药企业、科研机构、医院及高校提供分子生物学、细胞生物学、病理形态学等方面科研服务。公司核心团队曾在国内外许多优秀学府从事过多年研发工作,秉承“为客户创造价值,为员工实现梦想,为社会创造财富”的经营理念,坚持以技术创新为先导,以服务质量为根本,为中国生物医药和科学研究提供优质的产品和技术服务。