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PCR 反应体系(PCR试剂)

时间:2024-10-20      阅读:382

耐热DNA聚合酶

由于PCR的第一步需要在高温(90℃)下分离DNA链,因此所有PCR反应都需要能够在高温(约70°℃)下发挥作用的DNA聚合酶。

一种常见的PCR DNA聚合酶称为Taq聚合酶,从嗜热细菌水生栖热菌中获得,是一种热稳定性酶。

 

寡核苷酸引物

引物是短链核苷酸(DNA或RNA)与模板 DNA 互补,并充当 DNA/RNA聚合酶开始合成新 DNA的起点。引物是与模板DNA互补的短核苷酸链(DNA或RNA),充当 DNA/RNA聚合酶DNA合成的起点。它们对于 DNA合成的开始是必需的。与在退火过程完成后产生氢键的变性相比,引物与单链DNA 退火所需的温度(50-65°C)较低。


脱氧核糖核苷酸三磷酸(dNTP)

DNA聚合酶需要dNTP才能合成 DNA。


缓冲系统

得益于 PCR 缓冲液,PCR 反应始终保持最佳条件。

PCR缓冲液中的主要成分为Tris-HCI、氯-化-钾(KCI)和氯化镁(MgCl 2)。

为了在PCR过程中保持pH稳定,使用tris-HCI和KCI.为了确保 DNA聚合酶在 PCR 过程中正确进行 DNA合成,镁离子充当酶的辅助因子。


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