超微量分光光度计是现代分子生物实验室常规仪器
时间:2019-08-27 阅读:550
超微量分光光度计是一类很重要的分析仪器,无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理部门,超微量分光光度计都有广泛而重要的应用。超微量分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器,常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
超微量分光光度计目前成为现代分子生物实验室常规仪器,广泛应用于生命科学实验室蛋白质组学和基因组学等领域。应用液体的表面张力特性,检测时经上下臂的接触拉出固定的光径,达到快速、微量、高浓度检测吸光度的特点。
超微量分光光度计常用于定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的zui高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。
超微量分光光度计与传统分光光度计相比,优点在于:
(1)所需样品体积小,仅需1—2μl;
(2)不需要比色皿,用移液枪直接将样品滴加到检测平台上,测量时样品自动形成液柱,检测完成后只需用干净的吸水纸将样品从检测平台上擦拭干净即可,避免了因为比色皿清洗不净带来的交叉污染;
(3)一般具有多个光程,而传统分光光度计的光程为10mm,超微量分光光度计样品无需稀释,测量范围可达到常规分光光度计的50倍;
(4)氙气闪光灯为灯源,代替了氘灯(紫外)和钨灯(可见),使用寿命更长;
(5)不需要预热,可随时检测,检测时间短;
(6)显示吸光度值的同时,程序直接给出浓度值(核酸、蛋白和荧光染料);
(7)占据实验室空间体积比传统分光光度计小很多。