同一厂家的色谱柱，比如ODS的，长度，内径，粒度大小都相同，而出峰的保留时间，和峰形不一样，为什么呢？
ODS柱是一种常用的反相色谱柱，也叫C18柱；由于它是长链烷基键合相，有较高的碳含量和较好的疏水性，对多种类型的生物大分子有强的适应能力，因此在生物化学分析工作中应用广。

即便是同一个生产厂家，也有很多种不同的生产工艺。这在色谱柱的名字上有标识，比如EclipsePlus C18或者XBridge C18等等。

不同的工艺会使得色谱柱的酸碱性、极性、残余的硅羟基数量出现差别，就会有不同的选择性。

虽然AEA、PEA、OEA这三个主峰的出峰和峰型比较接近，但两个小杂峰的出峰位置不同。

如果同样的色谱条件却不能实现色谱分离，需要重新优化色谱条件。

如果这是一个杂质测定的实验，那不同的柱子就会得到不同的测定结果。

所以，同学们如果换了不同型号的C18柱，重新确认一下新色谱柱的保留时间比较好。在使用色谱柱的过程中，也需要注意流动相的选择。
关于流动相的选择原则是：①样品易溶，且溶解度尽可能大。②化学性质稳定，不损坏柱子。③不妨碍检测器检测，紫外波长处无吸收。④粘度低，流动性好。⑤易于从其中回收样品。⑥无毒或低毒，易于操作。⑦易于制成高纯度，即色谱纯。⑧废液易处理，不污染环境
C18使用指南
1、新柱在使用前需用纯有机试剂（如甲醇、乙腈）低流速冲洗，冲洗体积以×20柱体积为宜，以便固定相能得到润湿、碳链舒展，使色谱柱的性能达到状态；
2、使用时需在每日实验结束后冲洗色谱柱，当流动相中含有酸或盐时，需将色谱柱中的酸或盐冲洗干净，通常建议用10%甲醇水冲洗×20柱体积；
3、长期保存前要将色谱柱冲洗，建议冲洗3-4小时以上，保存在纯有机试剂或高 比例的有机试剂溶液（如90% 甲醇水）中；
4、日常保存溶剂（即需继续使用）尽量与3中相同；
5、由于C18柱（极性改性处理的除外）的固定相疏水性较强，在使用过程中尽量不要使用高水相条件，若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷，引起柱效下降，造成不可逆的负面影响，（Diamonsil 2）由于碳载量高，表现尤为明显，建议使用过程中水相比例不多过90% 
6、色谱柱压力升高、柱性能下降：通常为色谱柱被污染，对色谱柱进行再生处理可恢复部分柱效；
7、色谱柱压力骤升：通常由盐析出或筛板堵塞引起，若是盐析出，用10%甲醇水低流速冲洗至压力恢复即可；若判断并非盐析出，以纯甲醇或10%
甲醇水为流动相反冲色谱柱（将色谱柱反接，不接检测器），若反冲半小时仍无效果则说明反冲无效，需寻找其他原因。