从*了解液相
时间:2020-05-03 阅读:3661
HPLC的全称是:
高效液相色谱
High Performance Liquid Chromatography其中,Chromatography的词根Chrom在古希腊语中是颜色的意思,而我们色谱学堂,ChromClass也同样使用了Chrom这个词根。
色谱的本意是印有标准颜色和名称的色表,但是一种化学分析的方法怎么会得到这样的名字呢?这得从色谱技术的起源说起。
100多年前,德国科学家费德里希描述了采用滤纸来进行定性分析,进而在1906年,e国的植物学家茨维特利用碳酸钙作为基质,石油醚作为流动相成功分离了叶绿素和胡萝卜素。它们分离后呈现出不同颜色的条带,因此茨维特把这种分离技术取名为色谱。
现代的色谱技术有很多种,经常用的是气相色谱和液相色谱。其中,气相是通过温度和载气的作用将样品变为气态,在色谱柱中运动起来。但有的样品沸点太高,或者加热就分解,气相就不合适了。这时候,可以选择用液相色谱来分析。
结构
液相色谱一般由四个部分组成,分别是:
左右滑动查看HPLC结构
泵,把流动相连续、稳定的注入系统,提供稳定的推动力。
进样器,负责把液体样品引入系统。
色谱柱,样品在其上实现分离。
检测器,负责检测从色谱柱出来的样品。
分离过程
气相色谱的推动力来自于载气,而液相色谱的样品是被流动相溶解和推动的。
对于气相来说,载气只有氮气,氦气,氢气等有限的几种。
而在液相中,流动相可以有很多选择,并且不同种类,不同pH值,不同比例等等对分析的效果也会有很大影响。
样品通过进样器进样,可以选择手动进样,或者自动进样,根据方法需要,还可以使用控温的自动进样器得到更加稳定的结果。
接着,流动相带动着样品进入色谱柱。
色谱柱是液相分离的核心,通常来说,越长的柱子意味着越高的柱效,越短的柱子意味着越快的分离,直径越大意味着更大的容量,直径越小灵敏度越高。
样品在色谱柱中分离之后,进入检测器,将化学信号转化为电信号。经常用的是紫外、荧光这类光学检测器,也可以使用质谱检测器。
光学检测器的好处是不破坏样品,也就是说,从一个检测器出来之后样品可以完好无损的进入下一种检测器,比如先接紫外检测器,再接质谱检测器,就可以同时获得光谱和质谱的信息。
所有的信息终被色谱数据处理系统,也就是CDS记录和收集。CDS系统不仅收集数据还负责控制整个采集和分析的过程。