生物样品中糖基化分析检测方案
时间:2020-06-08 阅读:1106
蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一,在免疫识别、蛋白分泌、信号转导等
生命过程中发挥了中医院的作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体。特别是对于单克
隆抗体药物,多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。因此,发展分离效率高,检测灵敏
度好的糖基化分析方法对单克隆抗体药物分析具有十分重要的意义。
采用仪器:
§ 该系统的性能比传统的或优化的HPLC更出色,使色谱系统的工作效率更高, 线性速度、流速、耐压范围更宽。
§ 作为一款高度稳定,可靠,重现性好的色谱系统,超高效液相色谱系统已经 成功地在*各大实验室的各种苛刻分析领域中广泛应用。
§ 系统整体设计的独到之处在于沃特世的亚二微米杂化颗粒技术,与 当今传统的5 μm颗粒填料技术的HPLC系统相比,各方面性能得到了显著 的提高。
ACQUITY UPLC系统既可以单独使用,也可以与沃特世的光学与质谱检测技术配对使用,为各行各业提供完善的终端对终端的解决方案。自从其诞生,ACQUITY UPLC技术已经使分析学家抛开传统HPLC分离局限束缚进行更加深入探索。
优势与特点
§ 使用亚二微米颗粒填料所能得到的柱效:
• 相对5 μm颗粒尺寸柱子可以达到3倍以上的效率
• 分辨率高出5 μm颗粒尺寸柱子70%以上
• 进行梯度分离时,峰容量用于测量分辨能力
§ 在单位时间内分析的样品量更多,得到的信息更丰富:
• 在方法转换过程中,将5 μm颗粒尺寸的色谱柱转换为亚二微米颗粒尺寸的色谱柱,UPLC色谱柱的柱长只需要原色谱柱的三分之一,但是柱子的柱效可以保持不变。
• 可以在3倍以上的线速度流速上进行分离
• 分离效率提高9倍以上,同时不影响分辨率
§ 在检测越来低含量的化合物时,无需改变检测模式:
• 亚二微米颗粒尺寸的ACQUITY UPLC系统将灵敏度提高了70%
• 如果效率相同,但分析时间快了,也就是说,灵敏度比使用 5μm颗粒提高了3倍
• 抛开光学检测器来看质谱,色谱峰的低扩散增强了专属性,有效地提高了离子化效率,使ACQUITY UPLC成为各种规格质谱检测器的理想接口
§ 分辨率提高
§ 速度和灵敏度提高