流动相为什么要过滤呢?
时间:2020-06-17 阅读:4104
*,色谱体系是一种精密的设备,对结果的精确性要求也很高,因而,因为色谱体系的精密性和对结果分析的精确性要求,对样品的过滤显得尤为重要。咱们在样品制备的每步不可漫不经心。正如液相色谱体系的说明书中所要求的,活动相得须使用HPLC的试剂,且使用前须过滤。
为什么要减压过滤?
过滤能够维护色谱体系和色谱柱,长柱子的使用寿命,改善数据的精度。过滤能够消因为摩擦产生颗粒而引起的压力波动和无规律的杂质引起的基线波动。同时,过滤也能够去活动相中的颗粒杂质,免它们对内密封圈形成危害,或阻塞小孔管道、层析柱、线内过滤器及维护柱。
一般活动相在上仪器前须经过两个步骤:减压抽滤和超声
减压抽滤有两个意图,
一个是过滤掉气体,尤是有机相和水相混合的时分,会产生很多的气泡。这些气泡进入仪器就会堵住仪器和色谱柱,所以要除去。
一个是过滤掉不溶性微粒。你看一般的过滤膜是4.5um孔径的,这个是针对你的色谱柱而定的。色谱柱一般是5um的粒径,过滤的活动相里边小的毛絮啊,颗粒啊不会进入色谱柱。
超声的首要意图也是为了脱气,另外还助令溶液混合均匀等效果。不过超声首要是为了去掉溶剂瓶瓶壁和瓶底的气泡,所以没要超声太久的时间,3-5min够了。
总而言之,都是为了维护仪器和色谱柱,防气泡和杂质进入。
过滤用什么?
一般建议使用的过滤器。或许有人以为,过滤装置貌似挺贵,算了,买个砂芯漏斗得了。哎,同学,这么贵的房子都买了,还在乎一把锁?
使用的活动相过滤器,简单,而且全。
怎么过滤?
只需按照下图的说明,依次放置好滤器和管线,再发动真空泵可开始过滤。
在操作过程中,有一点需要留意,须用枯燥的过滤膜和枯燥的支撑底座进行过滤,以防空气在膜上形成气阻,这个阻力可使液体流速下降或阻挠液体流出。在将过滤膜放在滤器上之前,须保滤器是清洁、枯燥的。