BUNSEN本生：ELISA试剂实验细节盘点

　　ELISA试剂盒细节盘点

　　1. 样本收集

　　每个标本量收集体积=100ulx检测指标，如要做复孔，标本量收集体积=10Oul×检测指标×2。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20°℃或-70°℃条件下保存，避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20°℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。如需离心的样本，离心转速不宜过高(2000~3000)

　　2. ELISA加样

　　加样品时，单孔用量要求: ≥50ul/指标，如需要做2个复孔则血量≥100ul/指标。如果样本量不充足，具体用量可咨询您的专属销售。

　　3. 样品捕获抗体孵育

　　37C恒温孵育，避免温度变化过大

　　4. 洗涤

　　机洗: 将25x×洗涤缓冲液稀释成1×，1×洗涤缓冲液洗三次，每次加300uL浸泡60s手洗:手洗次数应比机洗次数多，浸泡时间也应适当延长

　　手洗容易导致吸附在酶标板底部的试剂脱落，从而导致结果偏小，手洗次数过多也会影响实验结果，建议机洗

　　5. 底物显色(TMB显色) 孵育

　　TMB在使用前应放置室温平衡30分钟，加的量为A、B各50uL

　　6. ELISA终止液终止反应

　　加完TMB终止液应让其混匀再在酶标仪上读数

　　7. 酶标仪读数

　　在450nm波长处测定O.D值

　　8. 根据O.D值计算样本浓度

　　使用软件拟合标准曲线，根据标准曲线的拟合度(r或R2)以及残差平方和(s)选择合适的曲线。

　　ELISA试剂盒本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。