BUNSEN资讯| 牛血清的介绍和概述

　　牛血清是动物血清中的一种，是细胞培养中重要的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，也是一种常用的生物化学试剂，有着广泛的应用。由于牛本身是大型动物，在研究上具有操作便捷性，收获效率高等优点，故牛血清行业应用非常普遍。

　　牛血清常分为胎牛血清，新生牛血清，小牛血清，成牛血清。

　　牛血清通常含有一定比例的蛋白质、糖类、矿物质和维生素;而成牛血清常被用作酸碱调节剂、细胞稳定性外源调节剂和促进修复和重组等。

　　【胎牛血清】(Foetal Bovine Serum，简称FBS)：是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段，血中含有丰富的生长发育因子，非常适合各种细胞的培养，一旦胚胎发育这些因子自动消失。因此8个月胎龄以上的牛胚胎，已接近足月，不能作为胎牛血清的原料来使用。

　　【新生牛血清】(Newborn Calf Serum，简称NBCS)：0—7天内(也有说法是0—30天内);

　　【小牛血清】(Calf Serum)：采自出生30天至1年的小牛。

　　【成牛血清】(Adult Bovine Serum，简称ABS)：采自成年牛收全血后分离得到血清。

　　怎样筛选合适的胎牛血清是细胞培养中一个非常关键的步骤，首先，将产品测定其pH值，非常重要，要保持在7.4至7.6的pH范围内;接下来，要检查有效成分， 检查其中的细胞因子、培养基添加剂和免疫抑制因子的质量水平;最后，细胞存活率的测定也很重要，由于内毒素直接参与细胞凋亡，对细胞培养结果影响较大，且不同批次的血清，内毒素差异又不易控制，牛血清的质量越高，细胞的生存率和能力也越高，可以替代部分试剂中添加的有机物。

　　内毒素含量越低，级别越高，以胎牛血清为例：

　　血清中内毒素含量≤10EU/ml时，此血清为特级胎牛血清;

　　血清中内毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml时，此血清为优级胎牛血清;

　　血清中内毒素含量≥ 25EU/ml时，此血清为标准级胎牛血清;

　　胎牛血清在细胞培养中的作用：

　　1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

　　2.提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调节它们所结合的物质活力。

　　3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

　　4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

　　5.起酸碱度缓冲液作用。

　　6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

　　7.参与细胞冻存。

　　在细胞培养中，胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%～20%(最常见为10%)的。具体到不同试验，应依据文献报导，或细胞类型或基础培养基的成分来确定相应浓度。胎牛血清应在-20℃储存，运输应干冰冷链运输，避免反复冻融，确保血清中因子活性不受影响，保证血清优良品质

　　储存条件：-20°C冻存。

　　胎牛血清解冻后，应按单次习惯用量分装，分装后的血清仍-20°C冻存。

　　若置于4°C的血清，应在一周内用完，用量频率少推荐使用EvaCell免分装50ml的规格哦

　　血清和培养基的配制，应遵循“现用现配”原则，保证更好的细胞培养效果。配好的培养液，应于一周内用完。

　　血清避免反复冻融，避免在4°C或更高温度储存过久，否则会破坏血清中有效活性成分和被污染，影响血清品质。

　　血清融化注意：

　　在水浴过程中，血清的平面要浸在水中。在融化过程中要慢慢摇动瓶身，使血清混匀，但摇动中尽量不要产生泡沫!

　　胎牛血清使用说明：血清从-20℃取出后，融化，按推荐体积加入到基础培养基中，混匀，制备成新鲜培养基(整个操作需在无菌超净台中进行，注意无菌操作)。配制好的培养基推荐在4℃保存，应在1周内用完。

　　关于热灭活：胎牛血清不推荐热灭活。

　　热灭活一般是指在做免疫相关的试验中，通过加热灭活掉血清中的补体，以避免对免疫试验的影响。

　　在胎牛血清中，由于胎龄原因，尚未形成完整的补体系统，因此，胎牛血清不会真正干预免疫试验。故不需灭活。

　　并且，热灭活反而可能导致胎牛血清中部分重要的生长因子的活性衰减，进而影响细胞培养效果。

　　若针对某些特殊试验，对于胎牛血清一定要做热灭活，国际上推荐热灭活的方法：40℃水浴,20min。

　　BUNSEN本生胎牛血清优势：

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