什么是elisa试剂盒?elisa试剂盒用来检测什么?
时间:2024-10-22 阅读:163
什么是elisa试剂盒?elisa试剂盒用来检测什么?
什么是elisa试剂盒?elisa是一种免疫学实验操作实验,中文名字叫酶联免疫吸附测定实验。酶联免疫吸附实验(elisa)是一种用来定量检测样本中的某种抗原方法。因此,因此在许多研究和检测领域中使用 ELISA 来检测和定量各种样本类型中的抗原,如使用 ELISA 分析细胞裂解物、血样、食品等特定物质。常见检测领域包括如生物学、医学、农学等。
elisa试剂盒原理
酶联免疫吸附实验(elisa)是一种高敏度的定量实验,通常用于测量生物样品中分析物的浓度,如细胞因子和抗体。这种方法的一般原理包括三个步骤:
首先是将目标分析物捕获或固定在微孔板上,然后用目标特异性检测蛋白检测分析物,最后就是酶反应,既共轭酶将底物转化为有色产物。根据不同的捕获方法和检测方法。
elisa方法
ELISA有四种主要的方法:直接法、间接法、夹心法和竞争法。每种类型的描述如下,并用图说明了分析物和抗体是如何结合和使用的。
1.直接法(酶标抗体结合抗原)
待测抗原粘附在微孔板的孔内,然后使用带酶标的一抗与抗原结合,最后加入底物进行显色,并检测吸光度。由于吸光度的大小与抗原体复合物的数量成一定的线性关系。因此,也就间接的实现了测定抗原数量的目标。
2.间接法(一抗结合抗原,酶标二抗结合一抗)
和直接法的区别在于两种抗体代替一种抗体,结合抗原的抗体(一抗)不带酶标记物,当抗原和抗体结合后,再使用带酶标的二抗结合一抗,加入底物显色并检测。
3.夹心法(捕获抗体和一抗结合抗原,酶标二抗结合一抗)
在间接法基础上又再发展出更为复杂的夹心法,它在微孔底部预先包被一种捕获抗体,用于结合抗原,在这个复合物的基础上再结合一抗、二抗并检测。
4.竞争法(酶标抗原和抗原竞争结合抗体)
无法同时结合捕获抗体和一抗的话,就不适合用夹心检测。此时可以在微孔板孔内包被抗体,同时提供带标记的同种抗原,把待检测抗原和标记抗原一起加入和抗体结合,由于两者会竞争结合抗体,所以最终检测的信号越高,证明代测抗原越少,反之则越多。
elisa试剂盒检测步骤
ELISA 是简单的血液检测之一。它快速、快捷,并且需要患者的血液样本。ELISA的整个过程如下所述。
抗体附着在作为固体表面的聚苯乙烯板上,并被细菌、其他抗体和激素吸引或具有亲和力。
将抗原-抗体混合物填充到包被有抗原的微量滴定板上,然后通过洗涤除去游离抗体。
添加对一抗具有特异性的二抗,该二抗通常与酶结合。
通过清洗板去除游离的酶联二抗。
最后,添加底物。底物被酶转化形成有色产物,可以通过分光光度法进行测量。
通过ELISA检测表明怀孕的HCG蛋白。将血液或尿液样本和与酶连接的纯化 HCG 组合添加到系统中。如果测试样品中不存在 HCG,则只有连接的酶与固体表面结合。
elisa试剂盒是用来检测什么的
elisa检测如下:
可以确定样品中抗体和抗原的存在。
它在食品工业中用于检测存在的任何食品过敏原。
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