Elisa操作—加显A显B 过程

　　ELISA试剂盒是一种常用于生物分子检测的实验工具，中文简称酶联免疫吸附实验。ELISA试剂盒通常包括特定抗体、酶标记的二抗、底物等多种生化试剂，可用于检测血清、尿液、唾液、细胞、组织等生物样品中的蛋白质、肽、荷尔蒙、抗体、细胞因子、病毒等生物分子。该技术广泛应用于医学、生物学、环境科学等领域。

　　产品特点

　　1、高效、灵敏、特异的抗体;

　　2、稳定的重复性和可靠性;

　　3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体;

　　4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;

　　5、节省实验经费。

　　ELISA操作步骤

　　1、包被：用PH9.6的CBS包被液稀释包被抗原至5μg/ml，酶标板中每孔加入50μl，室温、4℃或37℃过夜包被。

　　2、洗涤：弃包被液(用力拍干，再用无尘纸吸干)，用PH7.2-7.4的1×PBST洗涤液洗板3次(每孔均要加满)，每次3min~5min。

　　3、封闭：每孔加封闭液(1%BSA)250μl，37℃封闭2h。

　　4、洗涤：用1×PBST洗涤液洗板3次，每次3min~5min。

　　5、结合一抗：用1×PBST缓冲液1∶1000稀释被检血清，每孔100μl，要设立阴性对照，37℃孵育1.5h。

　　6、洗涤：同上。

　　7、结合酶标二抗：每孔加1×PBST缓冲液1000倍稀释的酶标二抗羊抗鼠IgG-HRP(稀释倍数根据产品不同有所不同，可按说明书进行)50μl，37℃孵育1h。

　　8、洗涤：同上。

　　9、显色：每孔加底物溶液(TMB)50μl，置室温避光显色10min。

　　10、待显色后，每孔加入50μl终止液(2mol/L H2SO4)终止反应。使用酶标仪读取450nm的OD值，以确定血清抗体水平。