荧光滤光片的选择分析
时间:2022-04-19 阅读:2833
荧光滤光片的工作原理:分子在吸收带吸收激发光谱,然后在发射带发射长波的辐射光谱,即形成了荧光光谱。
在分析领域,荧光可用于对生物和化学活性进行定性判别、定量分析和实时观察。
由于灵敏度高、特异性好、简便等特点,荧光滤光片广泛应用于生物和分析等领域。
荧光滤波片选取的原则是在成像端尽可能让荧光/发射光透过,同时*阻挡激发光,获得高信噪比。
尤其是对于多光子激发和全内反射显微镜的应用,微弱的噪声也会对成像效果造成很大的干扰,因此对信噪比的要求更高。
通常我们看滤光片的参数一般会看透射率光谱,但往往荧光相对于激发光的强度很弱,
选择滤光片更需要参考阻挡深度光谱图——OD值。OD值更能直观地反映滤光片对光的阻挡特性。
在选择激发滤光片和发射滤光片时,两者的阻挡深度光谱交点(OD交点)是重要的判断标准,
一般要求宽场光源激发是交点OD值大于5,激光激发时大于OD6,以实现较好的荧光信噪比。
通带的高透过率提高成像亮度,截止带的深截止度确保不必要的光都被阻挡在通带外,保证了成像质量的高信噪比和高对比度,在任何应用中产生最大的亮度和对比度。