PCR扩增仪的种类及用途
时间:2019-11-21 阅读:4961
PCR扩增仪又称为PCR基因扩增仪、PCR核酸扩增仪、聚合酶链反应核酸扩增仪,是利用PCR(Polymerase chain reaction,聚合酶链反应)技术对特定DNA扩增的一种仪器设备,被广泛运用于医学、生物学实验室中。
PCR扩增仪通常由热盖部件、热循环部件、传动部件、控制部件和电源部件等部分组成。
PCR技术的原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于靶序列两端互补的寡核苷酸引物,由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成。
PCR扩增仪的常见分类:
1. 普通PCR仪
一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪称作传统PCR仪,也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是用于简单的、对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科学研究、教学、医学临床、检验检疫等机构。
2. 梯度PCR仪
一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度,通常有12种温度梯度)的PCR仪称作梯度PCR仪。因为被扩增的不同DNA片段,其适退火温度是不同的,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增,就可以筛选出表达量高的适退火温度,进行有效的扩增。用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样节约成本的同时也节约了时间。梯度PCR仪在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增。主要应用于科研、教学机构。
3. 原位PCR仪
用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪称作原位PCR仪。如病源基因在细胞的位置或目的基因在细胞内的作用位置等。是保持细胞或组织的完整性,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶DNA所在位置上进行基因扩增。不但可以检测到靶DNA,又能标出靶序列在细胞内的位置,对于在分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有重大的实用价值。主要应用于临床、科研。
4. 实时荧光定量PCR仪
在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统的PCR仪称作荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统得出量化的实时结果输出。把这种PCR仪叫做实时荧光定量PCR仪(qPCR仪)。荧光定量PCR仪有单通道、双通道和多通道。当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道,有多荧光标记的时候用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记的目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同目的基因片段的量。主要用于医学临床检测、生物医药研发、食品行业、科研院校等机构。
PCR基因扩增仪的使用方法:
(1)首先准备好反应管;
(2)打开机盖,将反应管平稳、端正地置入,盖好机盖;
(3)打开电源开关,按照机器屏幕显示的提示设定程序。
PCR扩增仪在实验室中的作用:
PCR基因扩增仪采用专有的技术,有效避免了热传导的边缘效应问题,为PCR实验提供温度均一性,确保实验结果的可靠性和重复性,的温控系统,模式显示金属模块的温度变化,TUBE模式能模拟试管内试剂的温度变化,甚至考虑到了PCR反应体系对温度变化的影响,模块具有温度梯度功能,为前沿科研工作者提供30℃的温度梯度范围,满足苛刻的优化实验需求。
PCR基因扩增仪不仅拥有30℃的宽限梯度功能,可用来优化实验条件,满足苛刻的实验需求,同时延续了“USB”和联机联网功能,PCR界产品的时尚,在之前基础上,增加了LCD彩色触摸屏,使实验的显示和操作更为清晰和直接。
PCR扩增仪的选购标准:
实际上,PCR仪就是一个温度变化控制的设备,因此一般来说,在选择是的时候,温度控制是首先需要考虑的,准确控温是PCR仪质量好坏的关键,这其中就包括温度准确性、温度均一性、升降温速度等。
另外退火温度也是影响PCR仪扩增特性的一个重要因素,在理想状态下,退火温度需要足够低,以保证引物同目地序列有效结合,同时又需要足够高,以减少引物与DNA片段的非特异性结合。
后一个标准就是仪器的耐用性。由于PCR实验目前已经成为生命科学基础研究和检测实验室常规的实验方法,因此很多的实验室中多需要开展大量的PCR实验,这对于PCR仪是一个重要的考验,需要该仪器有充分的耐用性来适应频繁的试验过程。而影响仪器的使用寿命,如果不考虑维修的成本,则主要与半导体制冷片的寿命相关。
进口PCR仪和国产的PCR仪,在技术和使用性能上基本上没有多大的差别,比如:升降温速率,孔间温差,温度均一性,梯度温度范围,热盖温度等性能指标,国内外仪器基本达到了相同水平。PCR仪器的核心器件和技术为半导体及其温控技术,而现在大多数国产PCR厂家所用的都是进口的原核心配件。这就是为什么大多数PCR仪厂家的性能指标基本雷同的原因!上海惠诚生物科技有限公司代理销售众多品牌PCR扩增仪,在选购时更倾向于向大家推荐国产经济实惠型,如果您在选购时需要技术支持,请联系上海惠诚生物科技有限公司