总多酚含量测试试剂盒分光光度计法
时间：2020-05-22 阅读：1104
总多酚含量测试试剂盒(C001-96T 分光光度计法)
一.测定原理
福林酚试剂氧化多酚中-OH基团并使其显蓝色，蓝色的深浅与多酚的含量成正相关，没食子酸一般在该方法中被默认为标准物质，采用没食子酸溶液制作标准曲线，然后将多酚含量表示为等价没食子酸的量，即可求得待测样品中总多酚含量。
二.试剂组成
试剂一：酚试剂25mL×1瓶
试剂二：显色液 200mL ×1瓶
试剂三：1.0mg/mL没食子酸标准溶液 20mL×1瓶
三.储存条件及有效期
试剂一、试剂二4℃保存，试剂三-20℃保存，可保存3个月。
四.试剂的配制
试剂一应用液：将试剂用双蒸水10×稀释，制备成酚应用液，每次测试需使用2.5mL，根据样品数量计算好，用多少配制多少。
例：需要进行38次测试，则可配制40次使用量：40×2.5mL=100mL，量取10mL试剂一加入90mL双蒸水，充分混匀即可。
试剂三应用液：
分别采用移液管移取1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL试剂三于100mL容量瓶中，采用双蒸水定容至刻度，摇匀，制成浓度分别为10，20，30，40，50μg/mL的没食子酸应用液。
习惯用使用移液器的老师也可先在15mL离心管中分别加入9.9，9.8，9.7，9.6，9.5mL双蒸水，再采用移液器分别移取100，200，300，400，500 μL 试剂三于相应的离心管中，充分颠倒混匀，制成浓度分别为10，20，30，40，50μg/mL的没食子酸应用液。
五.操作步骤
| 标准管1 | 测定管 |
试剂一应用液（mL） | 2.5 | 2.5 |
样品溶液（mL） |
| 0.5 |
试剂三应用液（mL） | 0.5 |
|
充分混匀，室温静置5min使之充分反应2。
试剂二（mL）3 | 2 | 2 |
充分混匀，室温静置60min4，使用1cm光径比色皿，765nm处采用分光光度计测定吸光度。