总黄酮含量测试试剂盒分光光度计法测定原理及应用
时间:2020-11-05 阅读:4294
总黄酮含量测试试剂盒(C002-96T 分光光度计法)
一.测定原理
黄酮中处于相邻位的羰基、羟基可以共同络合金属而显色。在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐生成螯和物,加入碱溶液后显红橙色,在510nm处有大吸收峰。芦丁是*的黄酮类化合物,常被用作标准品。
二.试剂组成
试剂一:无色液体50mL ×1瓶
试剂二:无色液体50mL ×1瓶
试剂三:显色液200mL ×1瓶
试剂四:1.0mg/mL芦丁标准溶液5mL×1瓶
三.储存条件及有效期
试剂一、试剂二4℃保存,试剂三-20℃保存,可保存3个月。
四.试剂的配制
试剂四应用液:
取2mL试剂四,加入18mL双蒸水,稀释至20mL,得到100μg/mL的芦丁标准液,分别采用移液管移取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL试剂四于空试管中,加入4.0,3.0,2.0,1.0,0mL双蒸水,得到20,40,60,80,100 μg/mL芦丁标准液。
五.操作步骤
| 标准管1 | 测定管 | 空白管2 |
试剂一应用液(mL) | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
样品溶液(mL) |
| 2 | 2 |
试剂四应用液(mL) | 2 |
|
|
充分混匀,室温静置6min。
试剂二(mL) | 0.5 | 0.5 |
|
双蒸水(mL) |
|
| 1 |
充分混匀,室温静置6min。
试剂三(mL)3 | 2 | 2 | 2 |
充分混匀,室温静置15min,以试剂空白调零,分光光度计510nm处测吸光值。
品名 | 价格(元) | Stock |
C002-分光光度计法 | 1080 | YES |
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