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总黄酮含量测试试剂盒分光光度计法测定原理及应用

时间:2020-11-05      阅读:4294

总黄酮含量测试试剂盒(C002-96T 分光光度计法)

 

一.测定原理

黄酮中处于相邻位的羰基、羟基可以共同络合金属而显色。在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐生成螯和物,加入碱溶液后显红橙色,在510nm处有大吸收峰。芦丁是*的黄酮类化合物,常被用作标准品。

二.试剂组成

试剂一:无色液体50mL ×1瓶

试剂二:无色液体50mL ×1瓶

试剂三:显色液200mL ×1瓶

试剂四:1.0mg/mL芦丁标准溶液5mL×1瓶

三.储存条件及有效期

试剂一、试剂二4℃保存,试剂三-20℃保存,可保存3个月。

四.试剂的配制

试剂四应用液

取2mL试剂四,加入18mL双蒸水,稀释至20mL,得到100μg/mL的芦丁标准液,分别采用移液管移取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL试剂四于空试管中,加入4.0,3.0,2.0,1.0,0mL双蒸水,得到20,40,60,80,100 μg/mL芦丁标准液。

五.操作步骤

 

标准管1

测定管

空白管2

试剂一应用液(mL)

0.5

0.5

0.5

样品溶液(mL)

 

2

2

试剂四应用液(mL)

2

 

 

 

充分混匀,室温静置6min。

试剂二(mL)

0.5

0.5

 

双蒸水(mL)

 

 

1

 

充分混匀,室温静置6min。

试剂三(mL)3

2

2

2

 

 充分混匀,室温静置15min,以试剂空白调零,分光光度计510nm处测吸光值。

品名

价格(元)

Stock

C002-分光光度计法

1080

YES

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