琼脂糖预染预制胶电泳试剂盒使用中可能出现的问题上海惠诚生物专业解答
时间:2022-05-30 阅读:324
琼脂糖预染预制胶电泳试剂盒使用过程中可能出现一些问题,比如:如何选择预制胶浓度,选择什么体系,Marker条带电泳清晰但样品电泳很差,回收低,挂孔和图像不好等原因,惠诚生物针对推出的该款预制胶进行解答。
1、如何选择预制胶浓度?
不同分子量对应的预制胶浓度,实验情况很复杂,下表仅供参考:
2、能不能使用其他体系?
目前这款预制胶使用体系为TAE,不能在其他体系(如TBE/TPE)的电泳液中电泳;
3、Marker条带电泳清晰,样品电泳很差?
一般情况是样本的问题,因为胶只是一个平台,不改变核酸的结构和形态,具体解决方案如下:
A、调整电压(一般降低);B、减少上样量或者稀释;C、用新的制备样品;D、调整PCR 的条件(如退火温度)等等。
4、为什么回收低?
若回收低,需要调高熔胶温度和延长熔胶时间,具体原因如下:
A、胶是0.7cm 厚的标准胶,比用户自配的胶在切胶的位置厚很多,因此在切胶的过程中切的胶要比自配的胶多;
B、胶孔比用户原来自己的孔宽一点点,用户在切胶的过程中也会比自配的胶切的多。
这样的话,用户使用他们原来的习惯,在相同的时间胶没有*熔掉,回收量就会少很多。
5、出现挂孔的原因?
用户在电泳液外面点样,样品因为没有电泳液保护,会很快扩散到胶里,有可能形成挂孔。
6、图形不好怎么办?
预制胶因为在低温时间长,电泳时较好比客户经常使用的电压低一些,调低20-40伏特左右,会得到比较好的图形。
7、电泳是一个系统,任何原料都可能引起变化,任何改变也需要调整。根据实际需求,选择*优方案。