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黄酮中处于相邻位的羰基、羟基可以共同络合金属而显色。在中性或弱碱性及亚硝(空格)酸钠存在条件下，黄酮类化合物与铝盐生成螯和物，加入碱溶液后显红橙色，在510nm处有大吸收峰。芦丁是*的黄酮类化合物，常被用作标准品。
试剂一：无色液体2.5mL ×1瓶
试剂二：无色液体2.5mL ×1瓶
试剂三：显色液 10mL ×1瓶
试剂四：1.0mg/mL芦丁标准溶液 200μL×1瓶
试剂一、试剂二4℃保存，试剂三-20℃保存，可保存3个月。
试剂四应用液：
移取50μL试剂四，加入450 μL双蒸水，充分混匀，得到500 μL 浓度为100 μg/mL的芦丁标准液，分别采用移取0，20，40，60，80，100 μL于酶标板中，加入100，80，60，40，20，0μL双蒸水，得到0，20，40，60，80，100 μg/mL芦丁标准液（试剂四应用液）。
标准孔1 | 测定孔 | 空白孔2 | |
试剂一（μL） | 25 | 25 | |
样品溶液（μL） | 100 | 100 | |
试剂四应用液（μL） | 100 |
充分混匀，室温静置6min。
试剂二（μL） | 25 | 25 | |
双蒸水（μL） | 50 |
充分混匀，室温静置6min。
试剂三（μL）3 | 100 | 100 | 100 |
充分混匀，室温静置15min，以试剂空白调零，分光光度计510nm处测吸光值。
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