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面议琼脂糖预染预制胶电泳试剂盒使用中问题
琼脂糖预染预制胶电泳试剂盒使用过程中可能出现一些问题,比如:如何选择预制胶浓度,选择什么体系,Marker条带电泳清晰但样品电泳很差,回收低,挂孔和图像不好等原因,惠诚生物针对推出的该款预制胶进行解答。
1、如何选择预制胶浓度?
不同分子量对应的预制胶浓度,实验情况很复杂,下表仅供参考:
2、能不能使用其他体系?
目前这款预制胶使用体系为TAE,不能在其他体系(如TBE/TPE)的电泳液中电泳;
3、Marker条带电泳清晰,样品电泳很差?
一般情况是样本的问题,因为胶只是一个平台,不改变核酸的结构和形态,具体解决方案如下:
A、调整电压(一般降低);B、减少上样量或者稀释;C、用新的制备样品;D、调整PCR 的条件(如退火温度)等等。
4、为什么回收低?
若回收低,需要调高熔胶温度和延长熔胶时间,具体原因如下:
A、胶是0.7cm 厚的标准胶,比用户自配的胶在切胶的位置厚很多,因此在切胶的过程中切的胶要比自配的胶多;
B、胶孔比用户原来自己的孔宽一点点,用户在切胶的过程中也会比自配的胶切的多。
这样的话,用户使用他们原来的习惯,在相同的时间胶没有*熔掉,回收量就会少很多。
5、出现挂孔的原因?
用户在电泳液外面点样,样品因为没有电泳液保护,会很快扩散到胶里,有可能形成挂孔。
6、图形不好怎么办?
预制胶因为在低温时间长,电泳时最好比客户经常使用的电压低一些,调低20-40伏特左右,会得到比较好的图形。
7、电泳是一个系统,任何原料都可能引起变化,任何改变也需要调整。根据实际需求,选择*方案。
琼脂糖预染预制胶电泳试剂盒使用中问题
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