一、物理灭菌方法

1、干热灭菌法

主要是针对金属器械和玻璃器皿的消毒，将其放入电热烘箱内，在150~170℃下维持1~2h后，即可达到灭菌的目的；还有灼烧法灭菌，因其破坏力很强，故只适用于接种环、接种针的灭菌以及带病原体材料、动物尸体的焚毁等。

2、湿热灭菌法

是一类利用高温的水或水蒸气进行灭菌的方法，通常多指用100℃以上的加压蒸汽进行灭菌。在相同的温度和作用时间下，湿热灭菌比干热灭菌更有效，因为湿热蒸汽不但穿透力强，而且还能破坏维持蛋白质空间结构和稳定的氢键，即加速这一生命大分子物质的变性。

湿热灭菌法主要有以下几种：

（1）高压蒸汽灭菌法

利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升，以达到100 ℃以上高温灭菌的方法。 

方法：121℃维持15-20min。112℃维持20-30min。115℃维持20-30min。

应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度。

例如：生理盐水、营养琼脂等培养基用121 ℃。

含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培养基用112 ℃。

适用：耐高温物品，玻璃仪器、含水或不含水的物品。

（2）间歇灭菌法

将待灭菌物品在80-100℃蒸煮15-60min，冷却后搁置室温（28-37℃）下过夜，并重复以上过程三遍以上。

其蒸煮过程可杀死微生物的营养体，但不能杀死芽胞，室温过夜促使残留的芽孢萌发成营养体，再经蒸煮过程可杀死新的营养体；循环三次以上可保证灭菌的目的。

适用于不耐高温的物品灭菌，如不适于高压灭菌的特殊培养基、药品的灭菌。缺点是麻烦、费时。

（3）巴氏消毒法

这是一种专用于牛奶、啤酒、果酒或酱油等不宜进行高温灭菌的液态风味食品或调味料的低温消毒方法。此法可杀灭物料中的无芽孢病原菌，且不影响其原有风味。一般是在60~85℃下处理30分钟至15秒。

（4）煮沸消毒法

顾名思义就是在100℃下煮沸数分钟的方法，一般用于日常饮用水的消毒。

3、过滤除菌法

采用滤孔比细菌还小的筛子或滤膜作成各种过滤器，当空气或液体流经筛子或滤膜时，微生物不能通过滤孔而被阻留在一侧，从而达到灭菌的目的。但不能除去病毒。

实验室中常用的滤器：

滤膜过滤器、蔡氏过滤器、玻璃过滤器、磁土过滤器等。

过滤介质：醋酸纤维素膜、硝酸纤维素膜、聚丙烯膜；

以及石棉板、烧结陶瓷、烧结玻璃等。

应用：对于含酶、血清、维生素和氨基酸等热敏物质除菌。

4、辐射

紫外线灭菌

使用紫外灯照射，可以根据1W/M3来计算剂量，若以面积计算，一般30W的紫外灯可用于15M2的房间消毒，照射时间为20—30分钟，有效照射距离为1米左右。

二、化学杀菌消毒

消毒剂:可以抑制或杀灭微生物，但对人体也可能产生有害作用的化学试剂。—主要用于抑制或杀灭物体表面、器械、排泄物和环境中的微生物。

防腐剂:可以抑制或阻止微生物生长，但对人体或动物体的毒性较低的化学药剂。用于肌体表面，如皮肤、粘膜、伤口等处防止感染，也有的用于食品、饮料药品的防腐作用。

但现时消毒剂和防腐剂间的界限已并不很严格。

消毒防腐剂的作用机理一般有下列三种方式:

1、使微生物蛋白质凝固变性,发生沉淀.如酒精等。

2、破坏菌体的酶系统,影响菌体代谢.如过氧化氢等。

3、降低微生物表面张力,增加细胞膜的通透性,使细胞发生破裂或溶解.如来苏儿等酚类物质。