如何准备条件培养基样品

我们建议准备无血清或低血清培养基样品，因为血清往往含有可能产生显着背景信号的细胞因子。如果需要测试含有血清的培养基，我们建议还运行未培养的培养基空白来评估基线信号。然后可以从培养基样本数据中减去该基线。

• 第 0 天，在含有完quan培养基的 100 mm 组织培养板中接种约 100 万个细胞。*

• 第3天，除去培养基并用6-8ml无血清或低血清培养基（例如含有0.2%小牛血清的培养基）替换培养基。

• 第 5 天，将培养基收集到 15 ml 管中。在 4℃ 的离心机中以 2,000 rpm 的速度离心 10 分钟。保存上清液。将上清液转移至 1.5 ml Eppendorf 管中。将上清液储存在-80°C 直至实验。大多数样品可以通过这种方式保存至少一年。

*最佳接种细胞数量因细胞类型而异，可能需要凭经验确定。

注意：如果需要进行后续实验，强烈建议在制备后对所有样品进行分装，大程度地减少多次冻融循环导致的细胞因子降解。

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