解读微生物检测中的CFU
时间:2022-12-16 阅读:767
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767次在各种食品的微生物检验中,我们会看到标准中会涉及CFU/g或CFU/mL这些单位。
CFU:Colony-Forming Units(菌落形成单位)指单位体积中的细菌、霉菌、酵母等微生物的群落总数。在活菌培养计数时,由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落,称为菌落形成单位,以其表达活菌的数量。
虽然微生物无处不在,但由于其个体极其微小,往往无法通过肉眼看到,必须借助高倍显微镜甚至染色后才能清楚观察到。而菌落形成单位(CFU)则是通过分散、稀释,最终由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的肉眼可见的菌落数来反推样品中活菌数量的一种方式。这种方式得出的数据,并不是直接反映样品中的微生物数量,而是一种认可的估算,所以要求操作者平板涂布或者接种之前把微生物活细胞分散均匀。但一些链球菌、球菌等天生就不能单细胞分散均匀。另外,考虑到各类样品的微生物含量不一,为使CFU区间按照国标计算方法有效落在30-300之间,必须要保证合理的稀释倍数,过多或者过少都不合适。
《食品安全国家标准》--食品微生物中描述如下:
6.3菌落计数
可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony-forming units,CFU)表示。
6.3.1选取菌落数在30CUF~300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数,大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
6.3.2其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一般,而其余一半中菌落分布有很均匀,即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。
6.3.3当平板上出现菌落间无明显界限的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数。
CFU是一种估算方法,菌落形成单位的计量方式与一般的计数方式不同,一般直接在显微镜下计算菌体数量会将活与死的菌体全部算入,但是CFU只计算活的菌体数量,也就是说能够在平板上生长出来的活的微生物才会形成CFU。理论上,分散均匀的情况下,一个活细胞形成1CFU。在实际操作中为了更好分散,很经常用到涡旋振荡器进行混匀,但容易出现死菌。
同时,微生物最终能在平板培养基上形成菌落还与培养基类型、培养温度及时间、接种方式、潜在微生物类型均有关系。所以,您会发现,高温高湿天气时,烘焙食品中更容易出现各类霉菌、细菌污染的质量问题。
总而言之,CFU是一种估算方法。当出现CFU时,就代表了已经选择了这种估算方式,不同的单位也代表了过程的前后。
CFU的现实意义,举例来说,若定量菌种的菌种数量标示的是“CFU”,代表是用培养基法来计数的。若定量菌种是用流式细胞仪等其他方式计数,标示“个”更为合理。
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