登宁教你正确使用超滤管
时间:2020-01-02 阅读:3207
超滤管采用离心方式快速处理样品,是很多科研小伙伴们每天要用到的基本装备。但是,我们发现近90%的使用者在选择和使用过程中因为缺乏必要信息而没有获得好体验,更重要的是,宝贵的样本会遭受本可避免的损失!登宁小编就教你正确使用超滤管。
选对截留分子量,事半功倍
如果目的蛋白是120kDa,请问应该选择的超滤管规格是100k,50k,还是30k甚至10k?你采用1/2,1/3抑或1/6算法?一个确定NMWL 的超滤膜应该截留至少90% 以上的这个大小的球形分子,即100kDa的球形蛋白用100k的Ultracel再生纤维素膜得率超过90%。膜孔径要小于目的分子。因为样品分子形状不同,为了zui大化样品的回收,对于没有参考的样品,可以初步选择截留分子量约为目的分子分子量1/2的膜。
倒转离心,增大回收率
收取体积已经很小的浓缩好的样品时,超滤管上样体积有0.5/2/4/15/70mL等,除了采用低吸附的管材和zui低蛋白吸附的再生纤维素超滤膜,其中0.5mL,2mL和70mL的规格还特别设计了反转回收模式,以便使已经浓缩的样品增大回收率。
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