在赛默飞色谱柱的使用中，我们会发现很多实验室会面临色谱柱频繁损坏的问题。需要来了解一下色谱柱的损坏来源于哪些方面：

　　泵头密封圈的磨损；进样阀转子密封圈的磨损；析出的缓冲盐；样品中的复杂易吸附基质等等；其实，在工作过程中大多数的颗粒物堵塞导致的色谱柱背压升高问题是体现在柱头堵塞。而样品的易吸附机制也可能会和柱前端的硅胶表面游离的硅醇基发生作用导致色谱柱背压升高。但是这种情况在较低的PH系统中会有所改善，因为较低的PH系统会降低硅胶表面的硅醇基发生解离。

　　预防措施：

　　1、在液相系统中加入在线过滤器

　　在线过滤器的内部颗粒空隙一般是0.5微米，对于UHPLC会选择0.2微米空隙的在线过滤器。这个空隙尺寸和柱头的过滤筛板尺寸接近或者略小。所以，在线过滤器能够有效的阻隔来自样品、泵头密封垫、自动进样器的转子密封垫的颗粒物，以防止柱头过滤筛板的堵塞。注意：但是对于非常低死体积的液相系统，在线过滤器的加入可能会导致系统死体积增大峰展宽变严重的问题。而对于大多数的液相系统而言，色谱图不会有太大变化。

　　2、在柱子前端使用保护柱

　　保护柱有很多种，通用型、一体式、卡套式，但是它其实是一个和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。因为它具有和分析柱相同的内部填料，所以保护柱不仅可以阻隔颗粒物，还可以阻隔易吸附的样品基质组分。注意：由于保护柱中可能有大量的强保留组分，在用强溶剂清洗系统时请取下保护柱，以防止这些强保留组分被洗脱进分析柱。保护柱如果出现吸附饱和也可能会对分离效果有影响。

　　3、对样品进行净化处理

　　有一些液相的分析方法没有明确标注样品的净化，但我希望大家在做分析时都能够考虑样品的净化，常用的方案是对样品进行过滤。在实际工作中，赛默飞色谱柱的储存也会影响柱子的使用寿命。那么对于色谱柱的储存，也有以下建议：

　　4、使用时注意事项：

　　.为避免管路中的有机溶剂和气泡进入色谱柱，先用水冲洗整个色谱系统，然后才能接入凝胶柱。

　　.不要让有机溶剂进入柱中，否则会使填料脱水，导致柱床损坏，要小流速开启泵，不要快速加大流速，以防止压力迅猛升高而导致柱床损坏。15mm的柱子流速不要超过3ml/min。

　　.每次使用后务*蒸馏水冲洗干净将含盐的流动相置换干净，若较长时间不用请按保存方法保存。

　　5、保存方法：

　　.将凝胶柱用蒸馏水冲净后充上0.02%-0.05%的叠氮钠水溶液封存，或三氯丁醇苯基汞代盐将色谱柱封闭后低温保存(温度在5℃左右)在冰箱。

　　.再次使用时，用蒸馏水将保护溶液冲洗掉即可使用。

　　.如果次日还要使用也要从系统中取下，将赛默飞色谱柱封闭后存于4~8度的冰箱中冷藏。