说说细菌回复突变试验的数据处理与结果评价
时间:2022-03-09 阅读:2212
细菌回复突变试验用于检测DNA损伤引起的基因突变。通过检测受试物质对受试菌株某些特制突变体的突变能力,即使该菌株从组氨酸/色氨酸依赖型突变为原养型,判断受试物质是否为诱变剂。测试应在有和没有S9代谢激活系统的情况下同时进行。在琼脂培养基中添加微量组氨酸或色氨酸以培养细菌,可使细菌在最初的几个小时内生长并表现为背景苔藓。当添加的组氨酸/色氨酸用尽时,只有突变菌才能继续生长成可见的反向突变菌落。下面说说细菌回复突变试验的数据处理与结果评价。
1、回复菌落计数
直接计算培养基上的回复菌落数,计算每个菌株每剂量三个平板上回复菌落数的平均值和标准差。
2、合并方法的结果评价
在良好的背景生长条件下,试验菌株tal535、tal537、TA98和大肠杆菌的回复菌落数等于或大于未处理对照组的2倍,其他试验菌株回复菌落数等于或大于未处理对照组的2倍,有下列1和2情况之一可判定为阳性结果:
(1)剂量反应关系;
(2)一个测试点具有可重复的阳性结果。
3、细菌回复突变试验点试法的结果评价
如果供试物样纸周围有m个较密集的回复菌落,与未处理的对照有显着差异,可初步判定供试物突变试验阳性,但应通过掺入验证。测试。
4、验证
明显的阳性结果无需验证;可疑结果应通过其他方法验证;阴性结果需验证(即重复),改变试验条件,如剂量间隔(改为5倍间隔)等。
5、对照组结果评价
阳性结果表明受试物质在受试菌株的基因组中引起点突变。阴性结果表明受试物质在试验条件下未对试验菌株诱导基因突变。