酶诱导是指细胞在底物影响下进行特定酶合成量增加的作用。药物代谢主要发生在肝脏和肠道。其中肝脏代谢主要由位于肝细胞滑面内质网的细胞色素P450（Cytochrome P450，CYP）催化，少部分由非CYP酶（如UGT酶）催化代谢。据统计，临床上超过90%的药物由CYP450酶代谢。

PART.01    CYP450酶诱导机理及试验方法

现已证明CYP450酶表达受孕烷X受体 (PXR)、组成型雄烷受体 (CAR)、芳烃受体（AHR）等核受体调控。这3个核受体均为转录因子，当与配体结合激活后，核受体会从细胞质转入细胞核中。其中，PXR和AhR分别与细胞核内的视黄醛X受体（RXR）和转运蛋白（ARNT）形成异源二聚体，进而结合在相应靶基因上（如CYP酶），调节CYP酶的表达。AhR参与CYP1A2的诱导；PXR主要参与CYP3A4的诱导，其次是2C亚家族；CAR与PXR的诱导谱非常重叠，此外有研究表明CAR还可以诱导CYP2B6。因此，在药物早研期间，可只评估CYP1A2，CYP2B6 和 CYP3A4的诱导作用。

由于CYP酶诱导的试验是从“转录”、“翻译”、“蛋白质翻译后修饰”直至成为活性CYP酶蛋白，所以CYP酶试验系统必须是肝细胞而非其亚结构如肝微粒体或肝S9。随后在CYP450酶诱导试验时，通常需要结合酶活性和mRNA两个水平上的结果做结论。当仅做酶活性试验时，若药物同时存在酶抑制现象时，可能会掩盖诱导作用；而测量mRNA水平则能更真实地反应诱导源头上的效应，且更为敏感，直观地避免了酶活性检测存在的问题。

鉴于此，为满足客户精准地了解其早研药物的酶诱导作用，IPHASE技术人员成功研发人CYP450酶诱导表达检测试剂盒（SYBR法）！

PART.02    IPHASE产品

IPHASE作为创新药体外研究生物试剂，技术人员以SYBR染料法，采用ΔΔCT-定量PCR的方式检测CYP1A2、CYP2B6和CYP3A4这三个CYP酶基因经奥美拉唑、苯巴笔脱和利福平诱导后其mRNA水平的变化，发现其mRNA倍数变化均显著增加，满足药物相互作用指导原则，说明IPHASE人CYP450酶诱导mRNA水平检测试剂盒（SYBR法）能够满足客户在mRNA水平上进行酶诱导实验。

IPHASE人CYP450酶诱导mRNA水平检测试剂盒（SYBR法）提供给客户提供进行qPCR试验的扩增试剂，CYP1A2、CYP2B6和CYP3A4这三个CYP酶基因以及一个内参基因GAPDH的特异性引物。经验证，IPHASE所提供的特异性引物扩增效率高，且熔解曲线无杂峰，满足客户的试验需求。

图1.CYP1A2引物扩增效率图

注：R2=98.4%；Eff%=106.401%

（R2越接近100%扩增效率越好；Eff扩增效率越接近90%~110%越好，下同）

图2.CYP2B6引物扩增效率图

注：R2=98.5%；Eff%=95.791%

图3.CYP2B6熔解曲线图

图4.CYP3A4熔解曲线图

图5.内参基因GADPH标准曲线图

IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验，推出了多领域、多种类的科研试剂，为药物早期研发提供筛选工具，为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段，为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品，望广大科研工作者咨询。

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凡使用本公司产品，在国内及国际刊物上发表论文（论文发表日起一年内），并注明产品属于汇智和源/IPHASE所有，即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同，给予不同金额奖品：

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