Ⅰ相代谢稳定性试剂盒

IPHASE  Phase I metabolic stability kit

Ⅰ相代谢稳定性研究原理
肝药酶CYP即细胞色素P450氧化酶（CYP450），属于单加氧酶（momooxygenase），也称肝微粒体混合功能氧化酶，多位于内质网和线粒体内壁上，参与药物、致癌物、类固醇激素和脂肪酸等多种内、外源性物质代谢。肝药酶CYP氧化还原酶（POR）是所有肝微粒体酶的唯.一电子供体，通过还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，NADPH）将电子传递给CYP450酶，CYP450酶得到电子后再与底物发生氧化还原反应，从而发挥代谢活性。

肝微粒体中包含了大部分Ⅰ相酶，其中重要的是以CYP450为主要成分的微粒体混合功能氧化酶系统，在用肝微粒体进行研究时，如加入相应的辅助因子NADPH，则可重组体外代谢体系，从而通过体外温孵法进行Ⅰ相代谢稳定性研究。


Ⅰ相代谢稳定性试剂盒/肝微粒体代谢稳定性试剂盒
北京汇智泰康医药技术有限公司针对药物代谢研究的需要，以肝微粒体体外温孵法为指导，开发了一款专门用于Ⅰ相代谢稳定性研究的一相代谢稳定性试剂盒/肝微粒体代谢稳定性试剂盒，该产品可直接用于药物的Ⅰ相代谢稳定性研究，省去了肝微粒体制备和试剂配制的繁琐过程，大大缩短了实验周期，且试剂盒各组成成分经过严格的质量检测，符合Ⅰ相代谢稳定性研究试验要求，实验结果准确、可靠、重现性好。

本产品提供了药物Ⅰ相代谢研究用到的肝微粒体、NADPH再生系统及其它组分，可直接用于药物Ⅰ相代谢稳定性的研究。本产品可提供肝微粒体有：人肝微粒体、恒河猴肝微粒体、比格犬肝微粒体、大鼠肝微粒体和小鼠肝微粒体，可根据实际需求，选择不同种属的肝微粒体。


【试验原理】
肝微粒体中包含了大部分Ⅰ相酶，其中重要的是以CYP450为主要成分的微粒体混合功能氧化酶系统，在用肝微粒体进行研究时，如加入相应的辅助因子NADPH，则可重组体外代谢体系，从而通过体外温孵法进行Ⅰ相代谢稳定性研究。
【产品说明】
本产品提供了药物Ⅰ相代谢研究用到的所有试剂，可直接用于药物Ⅰ相代谢稳定性的研究，省去了试剂配制的繁琐过程，且试剂盒各组成成分经过严格的质量检测，实验结果准确、可靠、重现性好。
根据微粒体种属的不同，可根据实际需求选择人肝微粒体、恒河猴肝微粒体、比格犬肝微粒体、大鼠肝微粒体和小鼠肝微粒体中的其中一种。
【产品组成】
50反应/盒，200μL/反应。

【产品使用说明】
本产品需于-70℃冰箱冷冻保存，切记避免反复冻融。试验具体操作如下：
1、试验组：
1）冰浴融化试剂盒各组分，置于冰上待用；
2）除微粒体外，将孵育体系其它各组分按照配比混合并吹吸混匀，于37℃预孵育5min；
例：200μL孵育体系配制：

注：a.体系中有机溶剂加入量不得大于1%。
    b.若实际需要n个孵育体系，则需配置n＋1个体系。
3）将以上混合液195μL/管分装至1.5mL离心管中，于37℃水浴中保温， 5μL/反应加入肝微粒体，吹吸3次混匀于37℃水浴条件下启动代谢反应，使用秒表计时；
4）于设定孵育时间点，向孵育体系中加入200μL预冷的意境终止反应（预冷意境：孵育体系体积=1:1）。
2、对照组：
1）阳性对照组：将受试物换为阳性底物；
2）阴性对照组：不加A液、B液； 
3）空白对照组：只包含底物和PBS缓冲液。
【运输条件】
    干冰运输。
【注意事项】
1.试验开始前，请自行准备1.5mL离心管、不同规格枪头、37℃水浴锅等。
2.本产品仅供科研使用，不能用于人体及动物的治疗或临床诊断。
3.使用前，需于冰浴条件下解冻并混合均匀。
4.于-70℃冰箱冷冻保存，切勿反复冻融。
5.在使用过程中，也可根据实际实验需求调整各组分的加入量。

汇智泰康是一家位于中美两地的生物医药合同研发机构，整合中美两地的药物研发技术服务平台，基于AAALAC、GLP、ISO/IEC 17025实验室认证，面向企业及研发机构提供分析化学、DMPK、药理药效、生物学、以及毒理安全性评价产品与服务。

体外代谢其他产品：
Ⅰ相代谢稳定性试剂盒/肝微粒体代谢稳定性（一相代谢）试剂盒
II相代谢稳定性试剂盒/肝微粒体代谢稳定性（二相代谢）试剂盒
CYP450酶代谢表型研究试剂盒（化学抑制法/7种抑制剂）
CYP450酶代谢表型研究试剂盒（重组酶法/7种酶）
酶抑制（IC50）研究试剂盒（7种特异性底物）
肝微粒体（人，猴，犬，大鼠，小鼠）
肝S9（人，猴，犬，大鼠，小鼠）
肝原代细胞（人，猴，犬，大鼠，小鼠）
CYP450酶/细胞色素P450酶
NADPH再生系统
UGT孵育系统
PBS缓冲液
阳性底物

• [制药检测] Ⅰ相代谢稳定性研究原理及实验方法