稳转细胞系筛选

一、实验介绍

　　将我们所要的目的基因整合到宿主细胞上，随着细胞的生长繁殖，目的基因可以稳定的表达，在通过抗生素的不断加压筛选，最终得到构建稳定细胞系的过程。

二、实验目的：

　　获得稳转细胞系。

三、实验步骤

四、实验结果展示

五、送样运输要求：

1 冻存细胞

冻存管寄送前，使用封口膜把冻存管口封严密，冻存管单独用自封袋存放。干冰运输。运输时间在2天以内干冰用量在10kg，在2-4天，干冰用量在20kg。

2 活细胞

1. 使用T25瓶，瓶盖无孔。

2. 生长状态良好的细胞，细胞密度在30%-40%为宜，寄送前，移去瓶内旧培养基，添加新培养基至瓶颈部，保留微量空气，拧紧瓶盖，并用封口膜密封，瓶身用75%表面消毒，把瓶用无菌袋或自封袋包装，然后放置在适当的盒内，盒周围用棉花等做防震防压处理。当温度低于10度是要加保温措施，如暖宝宝等。

3. 细胞培养条件备注完整，如培养基，培养温度，FBS用量等。

4. 备注：运送时间原则在4天以内，如细胞生长速度快，则加入的培养基血清可以减半，细胞密度在20%-30%。