NuSmart^®核酸直接释放技术在EDTA抗凝血中应用第2篇

血常规检测中最经常使用的就是EDTA抗凝血，它能够用于血细胞形态、生化检测、血型鉴定、标志物检测、基因筛查等。常见的基因筛查都涉及到核酸提取和扩增。检验科或者实验室最常使用的方法就是离心柱或者磁珠提取法进行DNA或者RNA提取。但是以上方法有以下盲点：

1、离心柱提取无法自动化，一次提取量受限于离心机规模，而且无法高通量操作；

2、磁珠提取法虽然能够高通量，但是设备昂贵；

3、离心柱或者磁珠提取血量一般不低于200-300µL；

4、离心柱提取的核酸含量比较高，而磁珠依据厂家不同得率不稳定；

5、前处理时间比较长；

6、离心柱的批间差异相对于磁珠更好控制；

综上所述，两种方法各有优缺点，在通量、效率、自动化上很难两全。鉴于此情况，我司开发的NuSmart^®核酸直接释放技术和EDTA血检测相结合，仅需要10-20抗凝血，同时可以处理百份甚至千份血液。所含试剂中不包含有生物酶制剂，例如蛋白酶K，所以批间差异很小。总结如下：

— EDTA血量少

— 5分钟处理

— 高通量样本量

— 无脑操作

— 无需大型设备

操作流程

案例A 不同体积人EDTA抗凝血处理后扩增4对引物

1、0.1μL   2、1μL   3、10μL   4、20μL   5、50μL   6、100μL   7、200μL

使用NuSmart^®血液 PCR 试剂盒Plus（货号Nu-B02）处理不同体积人EDTA抗凝血，使用2×Master TaqMix(With Dye)分别扩增4对引物。

案例B 人EDTA抗凝血处理后在50μL体系下扩增

1、1μL   2、2μL   3、5μL   4、10μL   5、15μL   6、20μL   7、23μL

使用NuSmart^®血液 PCR 试剂盒Plus（货号Nu-B02）处理10μL人EDTA抗凝血。在50μL扩增体系中，使用1μL到23μL模版体积扩增4对引物。