呕吐毒素酶联免疫试剂盒检测原理及注意事项？

原理

测定的基础是抗原-抗体反应。微孔板上包被有抗抗体。加入呕吐毒素（DON）标准品或样品、酶标抗原和抗体后，游离的呕吐毒素与酶标抗原竞争结合抗体，抗体或抗体结合物与固定在微孔板上的抗抗体再结合，没有结合的标准品、酶标抗原及抗体被洗去，加入TMB底物显蓝色，加入终止液后颜色由蓝变黄，用酶标仪在450nm处检测，吸光值与样品中呕吐毒素含量成负相关，与标准曲线比较即可得出呕吐毒素的含量。

注意事项

1. 室温低于20℃或试剂及样品未回到室温（20- 25℃）会导致数值偏低。

2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥过久的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板排干后应立即进行下一步操作。

3. 标准物质和显色液对光敏感，避免直接暴露在光线下。

4. 混合要均匀，洗板要*（包括加样品和标准液的时候都必需充分混合均匀）。

5. 终止液为强酸性物质，避免接触皮肤。

6. 不要使用过了有效期的试剂盒，也不要混合使用不同批次的试剂盒，这样会引起测定结果不准确。

7. 试剂盒的储存条件是2-8℃，切勿冷冻。