亲和柱的使用要点介绍
时间:2023-05-26 阅读:864
2022年03月25日,国家市场监督管理总局发布了“市场监管总局办公厅关于开展2022检验检测机构能力验证工作的通知”,该通知中公布了验证计划共20项。项目涉及食品安全5项,消费品安全3项,电气安全3项,建材质量3项,材料测试3项,生态环境监测2项,医疗防护用品1项。FAPAS质控样品种类齐全,涵盖粮谷类,肉类,奶制品,蔬菜水果,酒及饮料,植物油,零食等,检测项目涵盖营养成分,重金属,真菌毒素,农残兽残,环境污染物,添加剂,过敏原等。
亲和柱样品经提取液提取、过滤、稀释,然后通过键合有特殊抗体的免疫亲和柱。此时,分析目标物被亲和柱中的抗体特异性的吸附,用水或缓冲液将免疫亲和柱上的杂质除去,然后用甲醇使抗体变性,从而将目标物从亲和柱上洗脱下来。用检测仪器进行定量检测。
亲和柱使用要点:
1、上柱的样品溶液应该保持酸碱中性、若偏酸或偏碱,可用PBS稀释调节;
2、样品添加回收试验时,标准品添加到样品中,静置2小时后或过夜,再进行样品前处理,否则会出现回收率偏低的现象。
3、亲和柱样品过柱洗脱速度要慢且均匀,约每秒1-2滴;
4、注意亲和柱的柱容量,若超过柱容量,上柱前请稀释;
5、 如果将标准品直接过柱验证回收率时,一定要确保标准上柱液中有机浓度不要超过25%,否则会影响柱子的吸附能力。
6、储存条件为4℃-8℃。切记0℃以下的低温,因为缓冲液冻结,会严重影响亲和柱内的物理结构,对质量影响很大,同时注意柱内保护液面,若泄露导致琼脂干燥,请勿使用;
7、试验中使用的玻璃仪器等,一定要清洗干净,尤其是用次氯酸等处理过的仪器,否则会使检测结果偏低。