中检维康iELisa呕吐毒素检测ELISA试剂盒概要
时间:2024-07-31 阅读:1085
呕吐毒素也称为脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON),是由串珠镰刀菌、轮状镰刀菌以及多育镰刀菌等产生的真菌毒素,大多存在于粮谷、饲料及其制品中。中毒后影响消化系统和神经系统,主要表现为呕吐、头痛、头晕、腹痛、腹泻等症状。我国标准规定:玉米、大麦、小麦及其制品中呕吐毒素不得超过1mg/kg,猪、犊牛、泌乳期动物配合饲料中呕吐毒素不得超过1mg/kg,牛、家禽配合饲料中呕吐毒素不得超过5mg/kg。
原理
测定的基础是抗原-抗体反应。微孔板上包被有抗抗体。加入呕吐毒素(DON)标准品或样品、酶标抗原和抗体后,游离的呕吐毒素与酶标抗原竞争结合抗体,抗体或抗体结合物与固定在微孔板上的抗抗体再结合,没有结合的标准品、酶标抗原及抗体被洗去,加入TMB底物显蓝色,加入终止液后颜色由蓝变黄,用酶标仪在450nm处检测,吸光值与样品中呕吐毒素含量成负相关,与标准曲线比较即可得出呕吐毒素的含量。
注意事项
室温低于20℃或试剂及样品未回到室温(20- 25℃)会导致数值偏低。
在洗板过程中如果出现板孔干燥过久的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板排干后应立即进行下一步操作。
标准物质和显色液对光敏感,避免直接暴露在光线下。
混合要均匀,洗板要*(包括加样品和标准液的时候都必需充分混合均匀)。
终止液为强酸性物质,避免接触皮肤。
不要使用过了有效期的试剂盒,也不要混合使用不同批次的试剂盒,这样会引起测定结果不准确。
试剂盒的储存条件是2-8℃,切勿冷冻。