使用超弹性骨的生物打印骨组织
时间：2024-02-04 阅读：45
概述
超弹性骨™是由 Dimension Inx 制成的一种材料，由超过 90% 的羟基磷灰石组成，羟基磷灰石是一种来自骨组织的天然矿物质。超弹性骨™在室温下打印，打印后可以接种细胞。使用此分步方案使用超弹性骨骼对骨组织进行生物打印。
下面用户说明中提供的推荐制剂产生了一种简化的可打印生物材料，可创建可重复的 3D 生物打印结构。但是，用户可以根据自己的需要修改准备工作。
材料
3 mL Dimension Inx 超弹性骨™（注：本产品已停售）
生物墨水混合器
5 mL 注射器
14G金属拉丝针
27G金属印针
砂纸印刷面
间充质干细胞
间充质干细胞生长培养基
骨组织生物打印方法
印刷：
将小瓶从 4°C 中取出，使其达到室温;
材料从冰箱中取出时看起来会变硬，因此在处理之前请等待它看起来是流动的（这可能需要一个多小时，并且根据室温而有所不同）;
使用生物墨水混合器剧烈涡旋材料，直到其均匀（这可能需要几分钟）;
注意：如果材料溶剂似乎大部分与粉末分离，您可以用胶带将小瓶固定在涡旋混合器上，并保持至少一小时。长时间混合小瓶将获得更好的打印体验。
使用 14G 针头刺穿样品瓶盖并绘制打印量 （3 mL），不要将样品瓶倒置以防止材料损失。超弹性骨™骼具有高度粘性，因此加载可能需要几分钟。我们建议您仅将此样品瓶用于一次打印会话。如果您将其用于更多会话，请确保将其适当密封。建议将刺破的盖子换成实心盖子，以便更好地进一步存放;
拉拔材料后，取下注射器柱塞和拉丝针;
从柱塞上取下塞子并将其放入注射器中;
将塞子放回注射器中，用柱塞推动它，直到它接触并均匀分布在注射器中的拉出材料。确保在用柱塞推动塞子时，它们不会重新连接;
放置 27G 打印针并装入您的 Allevi！
将粘合剂打印表面放在培养皿上。
印后：
在处理之前，让您的打印结构在通风橱中静置至少 2 小时。请注意，打印件在洗涤前可以无限期地存放在密封的玻璃容器中;
将打印的结构浸入 70% 乙醇中至少 1 小时。建议轻柔搅拌。更换乙醇，让您的物体再浸入水中一个小时;
用PBS（用于生物应用的无菌PBS）代替乙醇，并立即使用。如果您想存储此对象，请将其冷冻在 -20 ̊C、– 40 ̊C 或 -80 ̊C;
如果您没有使用我们的盘子并且您的结构与您的表面融合，请小心地使用剃须刀片将其取下。如果您确实使用过我们的盘子，只需戴上手套取下您的结构即可;
如果您愿意，您可以用剪刀、手术刀、活检打孔机等切割您的指纹。
细胞接种：
从打印的结构中吸出多余的液体，但不要让它干燥。细胞接种时应略微湿润;
10-15 μL 应接种在直径 5 mm、厚 1 mm 的印刷构建体中;
凝胶也可以注射到生物打印和洗涤的物体中。
打印设置
| 速度 （mm/s） | 层高 （mm） | 喷嘴直径 （mm） | 轨距 |
| 26 | 0.2 | 0.2 | 27 |
| 压力 （psi） | 交联（秒） | 打印温度 （°C） |
| ~30-40 | 0 | 室温 |
生物打印骨组织的警告
不要将液体形式的超弹性骨™存放在塑料容器中数小时，否则会变干。打印前尽量限制所有空气暴露，以确保佳打印体验;
使用比提供的针头规格更高（喷嘴直径更小）的针头进行打印可能会导致间歇性堵塞;
不要让液体形式的超弹性骨™长时间接触黑色金属，它会腐蚀它们。
不要让超弹性骨™与聚酯或聚苯乙烯接触，它会与它们融合。
不要让超弹性骨™达到 70 ̊C 以上的温度，否则它会融化。
不要试图用热、蒸汽、环氧乙烷或过氧化氢对打印结构进行灭菌。该材料含有二氯甲烷、2-丁氧基乙醇和邻苯二甲酸二丁酯。
仅用于研究目的。不供人类或临床使用。
