高效液相色谱仪定量环不同有什么影响?
时间:2021-08-20 阅读:4276
定量环适用于不锈钢或生物相容性PEEK制成的进样器。高效液相色谱仪定量环不同有什么影响?
如果仪器是自动进样:很明显,回路的大小决定了你的最大进样量。如果使用100ul定量环,则最大进样量必须小于100ul。如果仪器是手动进样:理论上,精确进样量是循环的一半以上。也就是说,如果你的仪器的是10ul,进样量在5ul-10ul范围内更准确。如果要进样1ul,结果的准确性就会受到质疑。常见的手动注射回路为20ul,注射量大部分为满刻度。因为人工操作误差大。因此,在同一个实验中,在平行条件下,变化的主要是试液的浓度,而不是进样量的大小。另外,一定要注意样品的清洁度,一定要过滤。否则,不溶性颗粒会堵塞回路并影响进样量。
定量环使用注意事项:
进样量和定量环是否必须匹配?如果为20ul,则按药典规定进样10ul。当进样量与回路匹配时,进样量应该是回路的2倍左右,哪个更准确?
这种情况下,可以换成10微升的循环来解决问题。您不能使用10微升进样针将样品注入20微升定量环。这是因为(1)10微升样品在充满流动相的20微升定量环中必须有样品溶液的扩散过程。浓度会不断变化,导致每次进样的峰面积不同,无法准确测定。(2)从进样回路的结构上也可以看出,10微升的进样量不可能全部进入定量回路。注射残留物无法消除。因此,这种进样方式会在每次进样量之间造成较大的偶然误差。鉴于以上两个原因,进样量至少是定量环体积的2倍才能填充样品整个定量环消除了浓度差引起的扩散过程和进样残留引起的进样量误差,确保进样准确。