生物制药实验中的注意事项和实验技巧分享
时间:2023-08-04 阅读:1028
在生物制药实验中,准确和可靠地测定药物的含量是非常重要的。为了保证实验结果的准确性,以下是一些实验技巧和注意事项:
1. 过滤溶液:当乙醇溶解主成分后,辅料不能溶解,并需要过滤。离心方法是一种常用的过滤方法,通过离心使辅料沉淀,并取上清液。注意,在离心过程中,部分离心管没有塞子,可以使用柔软的塑料薄膜袋和橡皮筋代替。与薄膜过滤法相比,离心过滤法不会对测定结果产生影响。此外,如果过滤操作不够快速,乙醇易挥发,可能会影响测定结果。
2. 超声波分散:在检验吲哒帕胺片的含量时,使用超声波超声可以使片剂更易分散,可以溶解主成分,并且没有浪费。与研磨转移方法相比,超声波分散对含量均匀度测定没有影响,且更简单方便。
3. 控制溶剂浓度:在检测中药材的浸出物时,一定要按照标准控制好溶剂的浓度(如乙醇等),否则检验结果可能会有很大的差异。
4. 对照品与供试品混合:在液相鉴别中,当供试品与对照品出峰时间不一致时,无法判断是否合格。可以将对照品与供试品各半配成混合溶液后进行进样,如果峰宽未变宽,未出现驼峰,则可判断为合格。
5. 考虑理化性质分离杂质:在进行原料残留物检测时,如果主药对杂质有干扰,现有方法无法检出。在自建方法时,要优先考虑利用理化性质将杂质分离出来,然后再进行测定,往往会取得意想不到的效果。
6. 生物制药实验中要考虑展开剂的温度与配制顺序:在进行药材薄层色谱鉴别时,应该考虑展开剂的温度与配制顺序。有时,这可能会对色谱的结果产生影响。
7. 非规定色谱柱和调整标准溶液浓度:在进行有机溶剂残留量检查时,不一定要坚持使用规定的色谱柱。通常情况下,DB-624色谱柱可以满足要求。此外,取样量也可以灵活调整,标准溶液浓度根据限度进行相应调整即可。
8. 饱和时间要够:在进行薄层色谱鉴别时,饱和时间一定要够长。
9. 控制流动相pH值:在使用HPLC测定物质含量时,如果流动相中使用了缓冲盐,一定要注意其pH值。因为在放置过程中,流动相的pH值可能会发生变化,而某些药物对这种变化非常敏感。
10. 控制温度:在使用HPLC测定物质含量时,温度的控制极其重要。最好使用带有柱温箱的设备,如果没有,则需在装置中保持恒温后再进行测定,否则可能出现基线飘移,结果不准确。
11. 特定品种对温度敏感:某些药物对温度的影响非常大。例如,有些品种的对照品溶液不能放在冰箱中,甚至需要在液相室内开空调,并在第二天才能使用。
12. 使用微量移液枪要注意"重压轻打":在使用微量移液枪时,要注意正确施加力量,以确保加液的准确性。
13. 分液加速:在进行一些乳膏的含量测定时,常使用提取分液。在分液时,如果两相的分界不清晰,可以加入少量的饱和氯化钠溶液。这样可以使分层更加明显。
14. 强调溶解时间:呋喃唑酮溶解较慢,溶解时间一定要足够长。
15. 避免干扰峰:在使用HPLC测定物质含量时,最好使用流动相溶解样品。否则,容易产生干扰峰,影响结果。特别注意可能出现的倒峰情况。
16. 分层加速:在低温环境下进行中药制剂的萃取时,往往会出现乳化现象,即两相不容易分层。这时可以加入少量的饱和氯化钠溶液,或者使用电吹风对分液漏斗进行加温,或者用热抹布覆盖,可以加速分层过程。
17. 注意试剂的含水量:在非水滴定中,试剂的含水量对结果有较大影响。例如,更换不同厂家的冰醋酸,实验结果可能会有差异。
18. 加快过滤速度:对于比较稠或量少的中药制剂溶液,在滤纸过滤之前,可以先通过离心使其分层,然后再过滤。这样可以加快过滤速度,减少有机溶剂的挥发(尤其是在环境温度较高时)。
19. 清洗检测器:在使用高效液相色谱仪测定人参、麻黄的含量时,由于检测波长为边缘波长(如203nm、207nm),通常一次检测不能成功。尤其是在使用一段时间后,检测器效果可能会下降。可以卸掉色谱柱,直接连接检测器,使用0.1%盐酸清洗检测池4小时,效果会有所改善。
20. 使用色谱纯试剂处理:在使用高效液相色谱仪测定含量时,可以使用色谱纯试剂处理对照品和样品,以减少误差。
以上是一些生物制药实验中的实验技巧和注意事项,这些技巧和注意事项的应用可以提高实验结果的准确性和可靠性。正确的实验操作和细致的注意事项对于药物研究和开发较为重要。更多实验室仪器、实验设备、实验耗材、实验试剂可以进入苏州阿尔法生物实验器材网站进行了解。