实时荧光定量 PCR（Real-time PCR）和常规 PCR（Conventional PCR）是两种不同的分子生物学技术，它们在实验操作、数据分析以及应用领域等方面存在差异。本文将详细介绍这两种技术的区别，帮助读者更好地理解和应用它们。

一、实验操作上的区别

1. Real-time PCR 操作：

   - 实时荧光定量 PCR 技术可以在 PCR 反应过程中实时监测荧光信号的变化。

   - 在 PCR 反应的指数增长期，荧光信号强度与 PCR 产物数量成正比，从而实现对 DNA 或 RNA 分子数量的定量分析。

2. 常规 PCR 操作：

   - 常规 PCR 技术是在 PCR 反应结束后通过琼脂糖凝胶电泳等方法检测 PCR 产物的累积量。

   - 虽然常规 PCR 技术可以通过扩增条带的亮度与已知浓度的条带进行比较，从而获得“半定量”的结果，但它无法实现对 DNA 或 RNA 分子数量的实时定量分析。

二、数据分析上的区别

1. Real-time PCR 数据分析：

   - 实时荧光定量 PCR 技术可以通过扩增曲线、标准曲线、Cp 值等数据进行定量分析。

   - 扩增曲线反映了 PCR 反应过程中荧光信号的变化，而标准曲线是基于一系列已知浓度的标准品绘制而成的。通过标准曲线，可以计算出未知样品中目的基因的浓度。

2. 常规 PCR 数据分析：

   - 常规 PCR 技术通常通过琼脂糖凝胶电泳等方法检测 PCR 产物的累积量。

   - 虽然可以通过扩增条带的亮度与已知浓度的条带进行比较，从而获得“半定量”的结果，但它无法实现对 DNA 或 RNA 分子数量的实时定量分析。

三、应用领域的区别

1. Real-time PCR 应用领域：

   - 基因表达定量：通过实时荧光定量 PCR 技术，可以检测特定基因在不同样品中的表达水平。

   - 病原菌检测：实时荧光定量 PCR 技术可以用于检测病原菌的基因序列，从而实现对病原菌的快速检测。

   - SNP 基因分型：实时荧光定量 PCR 技术可以用于检测 SNP 基因序列，从而实现对 SNP 基因型的分型。

   - 拷贝数变异：实时荧光定量 PCR 技术可以用于检测基因组中的拷贝数变异，从而了解基因的拷贝数变化。

2. 常规 PCR 应用领域：

   - 测序：常规 PCR 技术可以用于扩增目的基因序列，从而为测序提供足够的长度。

   - 基因分型：常规 PCR 技术可以用于扩增特定基因序列，从而实现对基因型的分型。

   - 克隆：常规 PCR 技术可以用于扩增目的基因序列，从而为克隆提供足够的长度。

   实时荧光定量 PCR 技术和常规 PCR 技术在实验操作、数据分析以及应用领域等方面存在差异。实时荧光定量 PCR 技术能够实现对 DNA 或 RNA 分子数量的实时定量分析，具有更高的灵敏度和准确性。而常规 PCR 技术虽然无法实现实时定量分析，但它具有更高的特异性和可靠性。根据实验需求和目的，选择合适的 PCR 技术对于获得准确可靠的实验结果具有重要意义。

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