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毛细管电泳仪的故障排除

时间:2023-05-31      阅读:968

毛细管电泳分离的检测原理基于被测组分和背景电解质的吸光度不同,当被测组分通过检测窗时,吸光度发生的变化服从朗伯-比尔定律,即在定的实验条件下,吸光度与被测组分的浓度成正比。

故障排除:

一、无电泳峰:

1、检查结果:没有电流。

可能原因:毛细管堵塞或断裂。

解决方案:用水冲洗毛细管,观察是否有水流出。若无水流出,拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂。若毛细管没断裂,可用水反向高压冲洗。缓冲液需过滤,将样品过滤或离心去除其中的颗粒。

2、检查结果:电流波动很大,甚至几乎消失。

可能原因:缓冲液中有气泡产生或区带中样品析出。

解决方案:将缓冲液超声脱气,如果还有此现象发生,则可能是区带中样品析出,可降低样品浓度。对于在缓冲液中溶解度不高的样品,需在缓冲液中加入添加剂。

3、检查结果:电流初始值较小,后逐渐增大。

可能原因:样品进样量过大。

解决方案:减少进样量。

二、电泳峰拖尾:

1、可能原因:毛细管窗口未开或窗口位置不正。

解决方案:打开毛细管检测窗口或调整窗口位置。

2、可能原因:样品在毛细管内壁吸附。

解决方案:对于蛋白质和核酸样品,应尽量采用涂层毛细管、pH条件或动态涂层,防止样品吸附。

 

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