2216E琼脂培养基的原理及使用方法
时间：2024-10-25 阅读：221
一、试验原理
用于海生细菌的培养和计数。
蛋白胨、酵母粉为微生物的生长提供碳源、氮源、维生素和生长因子，满足细菌生长的需求；各种无机盐提供与海水相似的环境，适合海生细菌的生长；琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方（g/L）
蛋白胨 | 5.0 |
酵母粉 | 1.0 |
柠檬酸铁 | 0.1 |
氯化钠 | 19.45 |
氯化镁 | 5.98 |
硫酸钠 | 3.24 |
氯化钙 | 1.8 |
氯hua钾 | 0.55 |
碳酸钠 | 0.16 |
溴化钾 | 0.08 |
氯化锶 | 0.034 |
硼酸 | 0.022 |
硅酸钠 | 0.004 |
氟化钠 | 0.0024 |
硝suan铵 | 0.0016 |
磷酸氢二钠 | 0.008 |
琼脂 | 15.0 |
pH 7.6±0.2 25℃ | |
三、试验方法
1、称取本品52.4 g，加热搅拌溶解于1000 mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，冷至50℃时，倾入无菌平皿。
2、制备质控菌液涂布接种到培养基中。
3、放置于20℃-25℃恒温培养箱中需氧培养40 h-72 h。
四、结果观察
接种以下质控菌株，放置于20℃-25℃恒温培养箱中需氧培养40 h-72 h。
质控菌株 | 菌株编号 | 接种量（CFU） | 回收率 | 生长情况 | 其它特征 |
副溶血性弧菌 | ATCC 17802 | 20-200 | ≥70% | +++ | 白色菌落 |
哈氏弧菌 | ATCC 14126 | 20-200 | ≥70% | +++ | 白色菌落 |
霍乱弧菌 | / | 20-200 | ≥70% | +++ | 白色菌落 |
图1 2216E琼脂培养基微生物质控结果
注：该培养基无机盐成分较多，灭菌前的溶解很关键，先加入水，边搅拌边缓慢加入干粉，不要让干粉成团；倒平板之前，应充分摇匀。
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